脐带间充质干细胞培养

lihaifengwl

回复 gondobar 的帖子7 G3 _8 @( n0 p0 _5 [7 P) `* @
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我是用无血清培养基养的

lihaifengwl

回复 Ivan0108 的帖子* ]' h# x7 Q& j+ A+ O1 Z' _3 F* ]
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从表型上看是干细胞表型，培养到第四代，一直传到7代，都是三天长满，一般我90%融合度就传了

alex19901

2*10^6细胞种瓶是种的175的瓶子吗 ？2-3天长的的确有点密集。不过这和培养基也是由一定关系的，和脐带组织本身的个体差异也有关系。你们最近有换过培养基没有，还是说卖培养基的公司培养基有所改进？你可以换着用5次方的密度种175的瓶子试试看，2-3天，如果还是这么密集的话，那估计是细胞长势过快的原因。如果没有，就考虑其他的原因，暂时无法判断是老化，老化的话可以看到细胞从瓶子底部脱落下来。

五口二木

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我想了解一下，你用的是啥牌的培养基，长得那么快，我用DMEM/F12基本一周才长满，我的传代密度是1*105

lihaifengwl

回复 alex19901 的帖子3 ]1 J4 w; X& [" y
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就是看着 细胞像杂草,拉长丝

lihaifengwl

回复 五口二木 的帖子" v' Y/ _0 }+ M3 t" R( R- j
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即时用DMEM/F12 +血清,我们也是3天 ,最多4天就满了,那时候就长过了,不知道您一周长满除了跟细胞有关系外,是否跟血清也有很大关系,另我传代密度一般在10000/平方厘米

卓俊文

多半是老化了，或者换批次培养基试试

fm001982

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: I/ G! |  g2 I0 D4 x: [# z首先，接种密度没必要那么大，当然，你细胞多得没地方用也无所谓。
( G+ B4 |1 L1 \" E" y其次，从图片上来看，细胞已经长得很多，甚至有分层的感觉，建议细胞在融合度80-90%左右传代。2 q& B+ W% v% `' v+ G2 C
最后，从形态上来看，细胞瘦长，可能是营养不足，有可能是无血清培养基的问题，也有可能是细胞太多造成的培养液不足。
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: c2 z" _3 ~) |% F还有补充一点，如果我按10000的浓度接种T75瓶，用15%浓度的血清培养，当细胞达到95%以上的融合度时，只需要24小时左右，所以很可能是你无血清培养基的问题。

kiss2346

传代密度感觉有些稍高，建议降低一半密度传代试试

Leo_yihan

回复 lihaifengwl 的帖子$ q1 U( m+ u6 q6 R

3 M$ e' c' }" F# b你的细胞好漂亮啊。请问培养基用的是什么？有添加什么生长因子之类的吗？我的细胞在第二代开始就老化了，找不到原因。