求推荐神经干细胞培养基或者因子

1125476931

求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现絮状物质，拿枪头吹也吹不散，三天后培养基中会出现絮状物质，絮状物之中有大量神经干细胞球，目前想换一种培养基对照一下，酶解的酶目前是用的TryplE

深海寂寞鱼

1125476931 发表于 2017-1-16 14:47 8 C, ~4 m: l5 _
求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现 ...

. [2 B- Y$ C5 F  y  i: v- F请问你使用胰酶进行细胞消化的吗？
7 j6 C/ ~/ E/ d  |$ Z. j$ h7 x% F6 J' ]5 `: X9 l( O9 F8 N3 r
就你描述的情况来看，感觉像是消化的稍微有些过，导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个：/ I- w( H% `$ D+ `2 Z
1. 如果科研经费不成经费，建议考虑换成Accutase进行细胞消化。. P3 h( C0 }6 K- f

  f- l# S+ b( r, [" C; ]. G2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶（具体浓度我忘记了，你可以查一下资料），这样可以消除絮状物l了。
7 U6 |/ ]1 ^) J" j9 R6 c  d    还有如果是用胰酶消化的话，消化时间不宜太长，消化后吹打不要力量太大。
2 i* T  J, w+ T0 \9 _' l* F! `& A; U( a
此外，神经干细胞不是非要通过酶消化法传代，机械吹打也可以用来进行传代，只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要，来选择传代方式。6 K: H- K1 C( X8 V
) M: F; N# c9 D8 Q
有问题多多交流。

wm阿咪

回复 深海寂寞鱼 的帖子
. P  \: p3 d; _5 \2 C" @9 P% v* q3 @' U
% w# }8 Z! D, ~5 L我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度，每次消化后单个细胞总是长不大了，然后就分化了。

wm阿咪

回复 1125476931 的帖子% P9 [, C; C, D& T$ ?" S0 A9 `

, S5 g  f2 P+ T( q用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。