我养的NK细胞第六天的，健康人外周血，请教下，大多数细胞团贴壁很牢，吹打都不能完全

cyl黄金杖

3 @9 L; H. H3 r0 V8 d9 j
NK细胞属于半悬浮半贴壁的细胞，从你发的图片来看，第六天细胞长成这样，NK纯度还是不错的。贴壁细胞团块过大，说明操作不及时。操作之前，需要适度力量怕打培养瓶，使贴壁细胞脱落培养瓶，拍不掉的，再用移液管吹打。为什么会沿着培养瓶四周贴壁，是因为4周往往是移液管吹打不到地方，越长斑越大，前几天细胞会自然贴壁，每天观察的时候要拍拍瓶子，大约6、7天开始细胞基本都是抱团悬浮的，像LZ第三张图片左半边部分的那些集落是不错的。

地球外世界

回复 淘知路遥 的帖子% i# C7 R& w) p3 B& |9 U; T' S

! F/ b$ y2 j( i- }! v培养NK培养到第几天，成熟，表面CD3-CD16+CD56+多少算正常？培养到多少天终止培养？

地球外世界

回复 快乐男孩 的帖子: w- I# `1 S. j4 c: X! n

0 C) V  B! H8 L6 E- Y( @8 f0 R% w% j/ V细胞状态感觉挺好的。团怎么会那么集中，而且大，厚？你是加凝集素之类的物质了吗？

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子" D/ g7 W  a: Q! N- ]/ M
- [7 d7 w# w* j( R. f: ^
回输最好时间是13-18天，没文件性要求规定表面标志物要达到多少算正常，各实验室培养的方法不一，一般可以达到30-60%吧，最好的有70-90%

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子
! k. d: [/ ?1 ~. @' F% B
) H6 A2 \% w: Y2 ~回输最好时间是13-18天，没文件性要求规定表面标志物要达到多少算正常，各实验室培养的方法不一，一般可以达到30-60%吧，最好的有70-90%

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子
3 t/ d* o8 o& l$ m& r9 P' I% D; P5 ]; ?; Y0 L" X
没有加咧，我们的细胞培养到第4天一个镜下区域有几十个如你图3左半边那种团块，出现图3右边那样的情况个人感觉是没有把细胞拍散，导致细胞大量集中贴壁

快乐男孩

回复 地球外世界 的帖子
. k  ]: K: x. w" X  {7 K" M8 }
9 I: {4 L5 s: W8 W9 @: ?+ u6 ^nk可以养到21天，流式CD3-要达到60%以上。

lihaifeng

回复 细胞之家 的帖子. c9 ?: |0 ~3 l
3 A) {& n% J& v2 f2 q' L
请问NK细胞密度一般到多少需要调整，调整到多大密度？

细胞之家

回复 lihaifeng 的帖子  T% ]/ Q; p6 c3 E& x* l

# C, m- v' B. m' }& y7 W( M$ w* z一般密度控制在1-3E+06之间，不过不同的培养体系，增值情况不同，不同的外周血也不一样，要自己摸索。多做几批次，试试。

shy-shen

回复 快乐男孩 的帖子$ U8 L3 i( M) W! m1 J# z

  n* ?3 X2 l* F$ F1 Z$ e你添加了什么因子，我现在做NKT的研发，有些贴壁很牢固，有些几乎不怎么贴壁