求助，脐带间充质干细胞培养那一个步骤最容易染菌？

细胞海洋

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iytbxxg

你说的可能有点片面，如果细胞培养发生污染了，去想原因其实有很多：
# X# ?# L2 k) Y. x0 I$ m6 h% x9 _1、脐样本来源已经发生污染，这种情况用酒精泡一分钟很难去污染，你所提出的可能应该都在这一块里。
3 X4 y3 E4 r8 e0 u2、开放操作环境发生污染，一般要求在百级的超净台里操作。$ F9 J9 e$ k. x% n6 ]# r" r
3、所用的试剂耗材发生污染，包括培养基。; B3 Z2 V' t1 ]5 t% [5 a
4、你人带入的污染，人的手在操作中是最大的污染源，要注重无菌操作。
0 S& j9 W: Y: _' w: o; A

519797934

顺产是在产房内完成，无菌操作相对较差，剖腹产在手术室，无菌操作相对较好，脐带污染就减少

yj729506

" H" V6 H" j# \' l0 f0 {/ R0 C" }' ^* b
1、我们实验室原代分离UC-MSCs不用酒精消毒，取来的脐带直接就是浸泡在含5×青链霉素混合液的PBS/无血清培养基中；$ ^; s3 U0 w; z
2、切割脐带的过程中也是用含1×青链霉素混合液的PBS洗涤，要做到没有血液的残留；  R6 ]4 N/ t: R+ ?% ^% `# L
3、你将脐带组织块切好后，建议你离心洗涤两次，这样洗的很彻底（因为我也是自己摸索，所以不知道这一步对组织有没有影响）；5 O- }0 y; \0 w+ B5 r% s, O6 {" ~
4、使用的所有器皿、器械都应该严格灭菌。4 k1 U* ]4 Y+ Z! h& F
5、你的污染了，有没有怀疑过你的培养环境？# ~1 x5 q  b1 b& |& v

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漾轩

脐带处理这一步很重要，无菌瓶采集，75%酒精浸泡脐带2-3分钟消毒，或者用含双抗的PBS清洗脐带，后期正常培养无菌操作，不会出现污染。

yanxm920

其实脐带来源最重要，在取的时候一定要注意避免染菌，需要与医院联系好，保证取的时候做到无菌；回实验室一定要注意消毒处理，另外就是无菌操作技术，其他的都不容易出现污染。