大家用血清终止胰酶消化应该用多少？

zuishui

我这有0.25%的胰酶，4ml左右应该用多少血清终止？胎牛和小牛血清有区别么？

yanxm920

需要先配制终止液，一般是10%血清的培养基即可；再进行终止消化，一般是胰酶与培养基1:1终止，但建议你培养基稍微多一些，效果更好！

zuishui

yanxm920 发表于 2017-5-24 11:39
  U' B1 y$ A5 E- R需要先配制终止液，一般是10%血清的培养基即可；再进行终止消化，一般是胰酶与培养基1:1终止，但建议你培养 ...

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谢谢，血清用区别胎牛和小牛么？另外，这终止液是要洗掉的吧，那我不用培养基而用PBS或盐水稀释血清是不是就不可以?

uslzhang

回复 zuishui 的帖子4 a3 Y+ w8 ^! |  W: ?9 i+ E! C

, z, M, A3 X7 ~& |* b8 o5 z您的问题提的有点笼统，不同来源的细胞所需要的消化液不同，终止消化的牛血清液有区别。至于终止液要不要洗掉要看你的细胞随后要做什么，牛血清残留是否干扰，PBS或盐水均可用于洗涤细胞，只要不影响细胞活性。

zuishui

回复 uslzhang 的帖子1 k, v+ [# q1 I0 o! m% o1 R

5 h/ p" P0 J  P, L+ ^3 N. s' b2 b脐带间充质干细胞，传代培养

baby00000003

建议你换成trypLE，比传统的trypsin粉剂不知方便多少倍～

garyxu

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$ \* W7 D: s5 C5 k: R
, E$ o, X& M+ U直接用盐水按盐水：消化液2:1的量终止消化，不过也要看你胰酶的浓度。

niliu730323143

10%血清的培养基，胰酶与培养基1:3。

木木木木

我用的是完全分装好的.0.05%EDTA混合液

uslzhang

回复 zuishui 的帖子% T0 Y! I; ]* |4 A% Q1 f

% X2 K5 t7 R% |4 ~+ N( _, h用完全培养基1:1