分离脐带间充质干细胞，收标本问题

jiandie

回复 fm001982 的帖子
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% T% V$ m9 N# ^3 ?6 C6 @谢谢，你们一般处理脐带多长时间

jiandie

回复 理科小文艺 的帖子. K5 d. `& I3 p: |& @' m

4 V% T8 r( C' V1 X没拧紧的倒是也没污染

jiandie

回复 444352110@qq 的帖子% |( P7 C* b: u$ x4 I

5 b$ B- q  w% d/ c! V5 U6 t操作两次是差不多的，可能是处理时间太长了吧。。

rzghc

标本的问题吧，我们处理都是很随意的也能长

zuishui

jiandie 发表于 2017-5-25 16:25
* ^/ a0 K# C: B; B5 I8 Q回复 zuishui 的帖子
9 }% r, h5 U& I- A, ~9 c1 Q! ?! u
$ M+ ^# a% y3 A; U, A( a* o; w" ~第一次出细胞贴壁，第二次没出细胞。。

0 b3 I7 q+ g+ R/ p3 k4 D我是问贴没贴上壁，是不是因为没贴上所以不出的~

zuishui

你没有提到你用的什么培养基啊，难道干贴啊？

jiandie

回复 zuishui 的帖子4 U- }4 P+ F8 n
& ~  I4 Y7 y! e4 ^7 v
先干贴让组织块贴壁，6-8小时加DMEM/F12

cuijiaoyan

收集脐带注意事项：1、脐带保存液无菌，脐带保存容器密封性要好，采集脐带时最好进行两端结扎（取中间部分）    2、运输温度4度最好，常温放置几个小时问题不大    3、从采集到分离时间间隔24h是没问题的，肯定可以爬出细胞   4、分离前最好用75%酒精对脐带进行清洗，清洗时间不宜过长   如果上述几点都没问题的话，那就不是采集导致的了，可能是脐带本身状态不好或者培养基不行 。     

剡溪兰客

体系的问题，我们采集的样本都是很长时间的，72小时都没养不出来的。一般来说要求48小时内。你的采集方式影响不大，关注培养体系，即使你培养出来也15天了，时间太长，这个时间我们基本都可以冻存了，用的就是贴壁法

金奇橙

最近培养的一根脐带，25天才爬出几个细胞，培养脐带需要有耐心等待，不要轻易放弃。5 [+ G$ `* w/ m* v8 S: e) i
双抗清洗时我一般浸泡5分钟左右。