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细胞计数用细胞计数板呀！方法如下：
/ u( r! K. ^% O# q细胞计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。
) g8 \3 L9 o) I: o! M
Y. P, [5 K: D计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。 2 J) d$ ~3 ?1 v) W0 w9 G7 _
) k. ~- h# z, ^" y: x8 Q
每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积为1㎜2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜3。其计算方法如下： ! u8 L# h9 G$ P7 X3 U
$ I' S6 S; v, L4 K7 x( T/ X1．16×25的计数板计算公式
7 e' T) g9 `9 f) Y) c9 }! m" ^! Y& ?$ {. y2 k! K
细胞数 ml=(100小格内的细胞数 100)×400×1000×稀释倍数 9 x _5 W7 r. q
2 ], z: i" Y5 t/ ~! O2 w' j2．25×16的计数板计算公式 0 g. x% z6 p/ F
6 n: z$ n# h3 ^. K: F细胞数 ml=(80小格内的细胞数 80)×400×1000×稀释倍数
: X+ ~- g+ _+ r N+ A
) I E7 i# K* N实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
- z* @8 y% F G% a. b! R具体操作：
# M9 Z6 E5 b# U" m# x3 z2 R6 m1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。$ i: Q3 u# }6 q) G4 \) K6 V+ y
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
/ b3 Q9 P9 g) y- x6 D+ x% d3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：
( O B5 [* U* Z/ M细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104
! E, H* U0 X5 E说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
1 o8 D3 q7 T% X* ?0 |公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：. o' Y6 d+ P% J/ p3 ?: |( \+ t( e
1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
$ N8 ], [6 t' f2 H1 D（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液） |
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发表于 2009-9-14 22:12
