干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 干细胞实验室技术交流 实验室综合讨论区 请教关于脐带组织贴壁法,如何提高原代细胞的数量。
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: yangzeqian
go

[请教] 请教关于脐带组织贴壁法,如何提高原代细胞的数量。     [复制链接]

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
239  
11
发表于 2017-11-15 10:44 |只看该作者
回复 yangzeqian 的帖子$ k- g2 z+ z4 D" n$ v$ l
* z; [  x# R7 l+ d
这倒是个不错的数据,我也做过好几次平行试验,一份脐带种两瓶,一瓶贴撕下来剪碎的华通氏胶,一瓶贴不撕直接剪的脐带组织,结果后者都会有一定程度的上皮细胞爬出来,对于传代时候的消化程度、间充干收集量以及传代完后的细胞状态都有影响。

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
59  
12
发表于 2017-11-15 11:42 |只看该作者
回复 santry 的帖子( s0 H" C8 G* Q- K5 ~  C  H7 ^* I

  l; a( D( Z- ^& j. t不知道是否试剂的影响,带羊膜贴壁上皮细胞在我的实验中爬出来的几率很小。间充质会在大约9-10天这个特定的时间段集中爬出迅速增值,实验传代也没有问题,很稳定。最近实验室让只取华通氏胶进行贴壁,细胞的状态以及爬出的时间反而不如以前。

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
59  
13
发表于 2017-11-15 11:43 |只看该作者
回复 santry 的帖子
* N! t/ s. g; z( c& Y* c' v! \# k  V4 Z) K
这个是。感谢回复6 z$ U& J1 ~$ q; |/ E! J0 `

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
31  
14
发表于 2017-11-15 13:08 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
学习了 正好最近才看了这方面资料

Rank: 2

积分
180 
威望
180  
包包
654  
15
发表于 2017-11-15 14:48 |只看该作者
1、剥离脐带的1根静脉和2根动脉后,撕扯华通氏胶;脐带的表皮(也叫羊膜)一定要除掉,否则细胞不纯;
$ G5 y% s- e: g2、华通氏胶撕下来后,用剪刀剪脐带组织剪成1-3mm3大小,用少量培养基贴壁培养。

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
59  
16
发表于 2017-11-16 12:19 |只看该作者
回复 yqw1996 的帖子
$ ^( X" ~+ d. u; v; I
6 c+ k) @/ k. W有时间可以多探讨

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
59  
17
发表于 2017-11-16 12:22 |只看该作者
回复 yanxm920 的帖子# w' b, D4 ]" Q/ x7 ?
8 |' C# d0 d5 C
恩,感谢解答。

Rank: 2

积分
151 
威望
151  
包包
439  

优秀会员

18
发表于 2017-11-28 09:18 |只看该作者
所有的对照试验都要控制好变量才有意义,你是不是用的同一根脐带做的对照试验?甚至再严谨一点,应该用同一根脐带的同一部位去做这个对照。因为不同脐带之间,同一脐带的不同部位之间,细胞的含量还是有一定区别的。据我的经验,去不去除表皮对细胞爬出速度影响不大,不去除表皮的话细胞纯度相对会低一点。

Rank: 2

积分
220 
威望
220  
包包
1104  

优秀会员 美女研究员 帅哥研究员

19
发表于 2017-11-30 10:13 |只看该作者
怎么样了?方法我有,就是没做过,请教讨论啊

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
67  
20
发表于 2017-12-1 09:56 |只看该作者
回复 yangzeqian 的帖子
. C! |" u$ A' C! g0 P; d
+ C8 C) n: |4 ]' P( X7 I5 M, ]3 w不能光看细胞要数量,带羊膜会有上皮细胞长出来,而且上皮细胞生长速度要快于间充质,你可以把之前做出来的细胞做一个流氏分析,就知道了。
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-17 22:06

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.