请教关于脐带组织贴壁法，如何提高原代细胞的数量。

santry

回复 yangzeqian 的帖子4 S4 G  d" p' [) f; v1 g/ D

  Z0 ~2 W% L; S- V6 j这倒是个不错的数据，我也做过好几次平行试验，一份脐带种两瓶，一瓶贴撕下来剪碎的华通氏胶，一瓶贴不撕直接剪的脐带组织，结果后者都会有一定程度的上皮细胞爬出来，对于传代时候的消化程度、间充干收集量以及传代完后的细胞状态都有影响。

yangzeqian

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$ K' r) u6 m9 _9 z5 `3 A
$ m6 w* ~7 `% V3 n6 s不知道是否试剂的影响，带羊膜贴壁上皮细胞在我的实验中爬出来的几率很小。间充质会在大约9-10天这个特定的时间段集中爬出迅速增值，实验传代也没有问题，很稳定。最近实验室让只取华通氏胶进行贴壁，细胞的状态以及爬出的时间反而不如以前。

yangzeqian

回复 santry 的帖子1 O! O/ `  h1 b
1 h, s8 N: i& D# _9 v
这个是。感谢回复
3 O6 i4 Z  G, `. e

yqw1996

学习了 正好最近才看了这方面资料

yanxm920

1、剥离脐带的1根静脉和2根动脉后，撕扯华通氏胶；脐带的表皮（也叫羊膜）一定要除掉，否则细胞不纯；
) W& M$ p' M# |" c+ r2 `# g2、华通氏胶撕下来后，用剪刀剪脐带组织剪成1-3mm3大小，用少量培养基贴壁培养。

yangzeqian

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$ L' L* X( ?8 p! a0 d' C! i
4 u; \( _) ^( ~有时间可以多探讨

yangzeqian

回复 yanxm920 的帖子8 _( R! E: J. g. X( c. _& f
' v/ m: H+ g7 [) m* o' i8 f' q; q7 b
恩，感谢解答。

fenglinzhu

所有的对照试验都要控制好变量才有意义，你是不是用的同一根脐带做的对照试验？甚至再严谨一点，应该用同一根脐带的同一部位去做这个对照。因为不同脐带之间，同一脐带的不同部位之间，细胞的含量还是有一定区别的。据我的经验，去不去除表皮对细胞爬出速度影响不大，不去除表皮的话细胞纯度相对会低一点。

免疫与细胞

怎么样了？方法我有，就是没做过，请教讨论啊

数盲飞飞

回复 yangzeqian 的帖子! x4 P1 A! p( \7 w: t

) \* T1 D6 n7 e4 T不能光看细胞要数量，带羊膜会有上皮细胞长出来，而且上皮细胞生长速度要快于间充质，你可以把之前做出来的细胞做一个流氏分析，就知道了。