Wista大鼠骨髓间充质干细胞培养与传代问题

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各位前辈好，小弟最近开始做骨髓间充质干细胞的课题，连续做了几次，感觉效果都不是很好，现将失败教训和困惑罗列，请教各位前辈经验
: |, @) u, k6 d2 t5 H% a我选择的是3-4周的wista大鼠，一般取一侧股骨，基本上刚好够1个25cm的培养瓶。培养基：10%FBS+1%双抗+低糖DMEM  消化液为0.25%胰酶# K1 e# h% J+ _% v6 {
出现的问题：原代短梭形细胞不明显，细胞形态很杂；第7天传代，胰酶消化2.5分钟，传代后第三天细胞呈现形态也不像短梭形，而是和成纤维细胞的样子很像。! {, \# R5 X9 A2 H  b8 @( U
各位前辈可否给出一点建议和帮助，谢谢！
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