请教-大家都怎么计数sphere的？

lh_kitty

个人觉得稀释一定浓度种板后，等长出来后在显微镜下肉眼计数吧，最好是96孔板，太大孔的话计数也不方便

amosummer

同样的细胞种植下去，观察成球的数量，应该细胞量不能太大吧。

leisong12

看到过相关文献，个人认为有两种方式，1. 无限稀释法种细胞入96孔板，标记每孔中只有一个细胞的孔，培养若干时间后，看那些只有一个细胞的孔是否长成瘤球，统计总的成球百分比，肯定要多种几个板子的，怎么也得有100个单细胞的孔吧。2. 可以在培养的孔板下面打上细方格，倒置显微镜下直接计数，不过这种方法有两个注意方面，一要摇匀孔板，一旦开始计数尽量轻柔，别有摇乱了，二细胞球不能太多，否则数不清。可能第一种方法更为科学，但实现起来不太容易，第二种方法略为粗放，可以找几个人分别多数几次，减小误差。

tunicate

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我们统计神经干细胞用的是第二种。培养在24孔板中记录sphere数量和直径……但是实验室刚开始做干细胞……有两点想请教一下。1是sphere数量和直径分别代表什么？我们虽然记录直径但最终结果只用了数量统计。看了一下似乎也有文献把直径小于某些范围的排除出计数。如果前者对应stemcell数量那后者呢？在统计时是否有参考意义？2是我们试过打散稀释种入96孔板但单细胞似乎活不了orz……不知道是操作问题还是细胞本身问题。

细胞海洋

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