microRNA诱导iPS的设想

ouyi2738

我觉得单纯用miRNA诱导ips还是有些困难的，毕竟它作用是抑制和降解mRNA。它能抑制控制分化的因子和多钱能性因子的抑制剂，我觉得很难单凭miRNA使内源多能因子的表达量达到能够逆转成体细胞的水平，08年NATURE BIOTECHNOLOGY 上好像有一篇用294替代c-myc的文章。我觉得可以将miRNA用在ES的建系上

qizhi502

大家都是不谋而合，我也再一直琢磨，毕竟每个microRNA所包含的靶位点都成百上千个基因，而这成百上千个基因的所涉及的通路也很多，提高ips效率的文章是已经出了，但纯粹用其诱导ips确实很难，靶位点太多并且有很多都不确定，但是总感觉这是可行的，oct4也是很多基因的转录因子。本来细胞内的通路就是正态分布，而不是0-1二项分布，简而言之——“量”。

fguw

Try first?

zsc78

感觉很多人已经开始做了，赶紧行动吧。+ ]: Y  D, M+ Q1 L
提供相关文献：

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Nature Biotechnology：microRNA诱导iPS可提高干细胞安全性
- e1 B7 M2 _( U4 m2 n美国加州大学旧金山分校的一组研究人员日前宣布，他们利用微RNA小分子取代一种可能致癌的转录因子，成功将实验鼠皮肤细胞转化为“诱导多功能干细胞(iPS细胞)”。相关论文发表在4月12日的《自然—生物技术》（Nature Biotechnology ）杂志网络版上。1 i5 q; Q$ i% T7 O+ d4 D+ A6 C5 [/ J' L/ x& M( y

& C2 Y1 q# x: s, a& l% @! o0 |4 e' h5 o1 viPS细胞是指体细胞经过基因“重新编排”，回归到胚胎干细胞的状态，从而具有类似胚胎干细胞的分化能力。科学家认为，这一技术将来有望用于培养完全不含病毒和外来基因的安全性更高的iPS细胞。5 L1 I0 K0 o9 |5 K. S+ Z- G" _+ Y# i( I% `& n

! v! r/ F8 k! h# S+ K- N) @6 U6 c3 Q6 P3 y对皮肤细胞进行“重排”使其成为iPS细胞涉及4种转录因子的表达。目前常用的方法是利用逆转录病毒作为载体将编码这4种转录因子的基因注入皮肤的成纤维细胞中，但其中3种转录因子可能诱发癌症，一定程度上限制了iPS细胞的应用前景。- r/ y% y% z1 T4 o2 i/ ^' L' ?1 i- c0 J+ y9 b; Z2 J
# z1 }2 s+ L/ x' U+ T& x6 H3 B7 C  ~1 u  a- u; ^  q
加州大学旧金山分校的科研小组尝试用微RNA分子取代其中一种转录因子，其他3种转录因子的基因仍由逆转录病毒载入。实验中，他们将微RNA混入油脂，使其可以顺利穿过成纤维细胞的细胞膜进入细胞中。" I  z) K5 F* Q0 W. B. f
! L( a5 c3 m5 ^3 C1 b; z8 S' I6 Z2 i' j+ w
: \! D: o$ K3 I  ^. h9 h) q* Y观察发现，微RNA可以替代转录因子发挥“诱导”功能，经过这种改造的实验鼠皮肤成纤维细胞可以分化为实验鼠所有类型的细胞。5 W9 p7 f8 v2 b* a7 C+ D
) i/ y# |# F6 L, \3 s* {+ K1 m6 X2 F
# V7 D, x2 M. G负责该项目的细胞生物学家罗伯特·贝尔洛克说：“利用类似微RNA小分子控制细胞的方法，在未来的干细胞生物学研究中将扮演重要的角色。”他们下一步的研究重点是破解微RNA在上述过程中发挥作用的机制，将来进一步开发出利用微RNA完全取代上述4种转录因子培养iPS细胞的方法
% q* ]5 J4 c7 I: ]* s, r% D+ {8 K# H: P8 t& w5 [$ ]; T; v6 R/ k+ c) }
9 i) G, E/ z- M- @& b, B2 p# n+ C' C4 |4 W6 i+ ^% n" D- e; A
2 q3 Z9 D# {& @/ O/ W1 ^, f) x1 W; y原始出处：( C6 G  \# [. ^0 \" b' O% q; J# q
7 ~9 z, }' y! s1 L; g; |# X, ]+ k5 z3 `0 q- {3 G, K3 ]
4 H. `9 X% \0 M! x( Q; ZNature Biotechnology，doi:10.1038/nbt.1535，Robert L Judson，Robert Blelloch0 i- u9 B# T* N/ h9 x4 Q  C! O) k5 `% X8 B' L4 `
, B% ?6 D4 v" @* |5 F+ e, c) [* T( @9 R6 @4 t
Embryonic stem cell–specific microRNAs promote induced pluripotency
+ E! R* M3 u. Z  F4 j, Q6 D- G3 W. C! U7 U1 O! S" d+ m
1 Y# o; H0 U# H% i4 \/ _0 k6 M# P  MRobert L Judson1, Joshua E Babiarz1, Monica Venere1 & Robert Blelloch1) E5 v  _: D* h6 j. z
7 U7 W/ Y0 p: A' A( e# q6 Z
) S# s+ g% i3 y- Y% l; q( O* N# l$ q0 m0 }& @: Z8 oThis report demonstrates that introduction of microRNAs (miRNAs) specific to embryonic stem cells enhances the production of mouse induced pluripotent stem (iPS) cells. The miRNAs miR-291-3p, miR-294 and miR-295 increase the efficiency of reprogramming by Oct4, Sox2 and Klf4, but not by these factors plus cMyc. cMyc binds the promoter of the miRNAs, suggesting that they are downstream effectors of cMyc during reprogramming. However, unlike cMyc, the miRNAs induce a homogeneous population of iPS cell colonies.
5 z. [* s3 F: s/ ~, f& l& C. ~) ?( O' Y* B, W3 X2 J! l+ o5 R2 k, |$ V. S3 B' l0 F
/ D, n! f* H8 R( i6 KThe Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research, Center for Reproductive Sciences, and Department of Urology, University of California, San Francisco, San Francisco, California, USA.

liulilin

同志们  其实关于iPS的诱导机理还存在争议的，有人认为是重编程的，有人认为iPS是成体细胞本省固有的一种母细胞 是通过筛选出来的。此因这些机制并非确定的条件下去做 有两种结果，失败  或成功 并能进一步证明iPS的诱导机理。

qizhi502

在各种的来源的ips的被诱导出来之后，’iPS是成体细胞本省固有的一种母细胞‘这个谬论不攻自破，ips是一种有效的重编程方法

FYH

导入转录因子（Oct4、Sox2、Lin28和Naong）相应mRNA可将人成纤维细胞重编程为iPS细胞；Lin等仅用ES细胞特异性miRNA-302将人皮肤癌细胞重编程为ES细胞样多能干细胞；此外，导入ES细胞特异性miR-290家族的miR-291-3p、miR-294及miR-295(三者可替代c-Myc )或抑制仅在成体细胞大量表达的miR-let7均可提高iPS细胞生成效率.

tanguixiang

预实验发现let-7c可以促进成纤维细胞MET现象，可以试试

人在日本

预实验发现let-7c可以促进成纤维细胞MET现象，可以试试
; p5 l  R. N0 ~5 p7 J% F% wtanguixiang 发表于 2010-8-31 15:23

  h4 o8 y0 h3 y" n1 a# N2 a
: N. I8 A/ g% \+ n/ b2 k) L* [) K# Y% _) x3 J/ E. T
    你说的预实验是自己做的还是文献报道的啊