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楼主: smkx
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发表于 2010-4-20 17:37 |只看该作者
本帖最后由 smkx 于 2010-4-20 17:42 编辑 $ O4 o) m6 W" Z2 Z

, @5 W$ |5 i4 f- U+ v回复 8# get0715
0 q2 R4 N: A+ G% @. H, g1 i% `- l( l( ?- ?* r$ B7 B

: U1 K+ E# n! c6 c0 n8 z    不知道培养基的PH是否造成重大影响。可能过酸。突然想起来的。PH计没有使用好。谢谢指点。
% f. t" f. D1 V% ]" ~  组织的取材确实还没有经验。
' x# V' _3 @3 l2 j" @% ^  @& K7 ?  一般神经球应该5-7天长出,但是我做的这个3天内就出现上面50-100μm左右的集落了。
4 u) S2 x3 |# w1 H) `4 T/ W$ z不是正常东东。
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发表于 2010-4-20 17:37 |只看该作者
细胞的状态很是奇怪!
, P1 H5 g) ^. j! n成了透明的空泡状,我觉得可能是死细胞了。
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smkx + 1 + 2 谢谢
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发表于 2010-4-20 17:40 |只看该作者
回复 9# qingnuanrenxin
' x/ t/ s0 _! A2 }" w  X8 O+ l
$ [' F. w" @! w
4 q/ Y1 ~1 b+ b  ]/ s+ U    有分享就有收获。谢谢大家。

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发表于 2010-4-20 17:44 |只看该作者
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回复 12# iseeyou1210
. d. C/ Q6 F% q. L2 w, T
$ x' `, i7 o* q1 ^* a7 X( b- b1 j8 @9 g" C- z
    有可能!

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发表于 2010-4-20 22:04 |只看该作者
一起过来学习学习

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发表于 2010-4-21 09:29 |只看该作者
很多方面都会有影响,像你说的pH值也可能是一方面,你用的DMEM颜色可能要稍微红一点才正常,如果用DMEM/F12就是那种稍微深一点的橘红色,可能描述的不太到位,还是测一下吧。
) E$ I$ u8 e0 [1 P! P如果不是胚胎,取组织的时候一定要找准是哪部分是你需要的。如果接种细胞密度大一些(大于1-9*106/mL),用不上5天就能成球状了。
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smkx + 1 + 2 thanks!
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发表于 2010-4-22 15:25 |只看该作者
我觉得第一张图,那些不是神经球,只是一些一些细胞的集团,. i$ v" m% Y+ c4 j% }
可能是原代取组织的时候没有消化成单细胞。不知道楼主,8 o8 B2 J0 {  F! A/ G0 j6 r! _
取组织铺板后有没有观察过。
) ]7 |, e" }( p
% R+ Q0 ]5 E& O! U* M0 }& {第2张图应该是球了,但是状态看起来不行。似乎快死了……
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smkx + 1 + 2 谢谢你
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发表于 2010-4-24 08:12 |只看该作者
本帖最后由 smkx 于 2010-4-24 08:15 编辑 " `. m. U3 J7 Y3 l* R  Y( }
% I1 }, d# H5 r; H5 ]3 D" ]
回复 17# dulaiyouyu 8 @; X6 L5 C- d3 Y' k7 P9 Y
- r8 {1 U4 ^- [* Z. k

8 c9 t- ^7 z7 T# F   消化后进行了观察, 前2张是消化成单细胞后有生长出来的,但似乎所有细胞都是透明空泡的感觉。状态确实存在问题,但是这种状态可以一直维持。几天后依然如此。最后一张是文献的图片。现在我的问题是,这种情况是普遍的吗?在培养神经干的过程中,大家都遇见过这种形态的细胞团吗?目前在做RT-PCR鉴定。今天观察结果。谢谢!
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发表于 2010-4-26 15:54 |只看该作者
非常 感谢

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发表于 2010-4-27 22:48 |只看该作者
感觉神经球的状态不是很好,有杂质的东西在球表面,你传代时确定细胞已经打散成单细胞了不?
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smkx + 1 + 2 thanks
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