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楼主: xxzhang83
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细胞在诱导过程中传代好还是不传代好?   [复制链接]

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发表于 2010-5-13 21:21 |只看该作者
最好不要传代,诱导后再传代就会影响分化!

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发表于 2010-5-17 20:53 |只看该作者
这个问题就很宽泛了,可能不同的实验室,不同的人对此都会有不同的看法,在我看过的文献中,没有明确的提及是否传代。参照7楼的意见,你可以作一个对比实验,要注意实验条件的控制。个人觉得,如果传代与否对下面进行诱导分化影响不大的话,还是建议不要传代培养,因为在以后的研究与应用中,传代成本肯定要高,不划算。
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发表于 2010-5-20 22:36 |只看该作者
传代的目的是什么?我认为诱导过程中一般情况是不用传代的,至少我们是这样做的,但没做过成内皮分化。
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发表于 2010-6-5 16:48 |只看该作者
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我很想知道到底要不要传代,我也专门请教过做的很成功的前辈,他给的回复是不需要传代,跟8楼的说法一致,抑制其增殖有利于分化。我也觉得做个对照会很好的吧
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发表于 2010-6-17 17:42 |只看该作者
mitomycin C处理后,对细胞的状态会不会有影响?会不会影响分化啊?看来要好好看看你说的这个文献
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发表于 2010-7-1 10:43 |只看该作者
我对这个问题也很好奇啊,我们在诱导MSCS像胰岛细胞分化的过程中也没有传代,但是在诱导培养一段时间后,MS ...
" i# O1 l& A3 Y* h3 s: Ebypw 发表于 2010-5-9 10:11

1 f/ Z7 O; z0 g; }, K$ `$ |$ q" D+ A

$ R: }$ S" E2 ]+ L6 W) n- L    我最近也在做向胰岛细胞诱导过程中,也发现细胞突然大量增殖,在六孔板中呈环状密集生长,也有大量细胞漂浮,郁闷中
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发表于 2010-11-10 04:53 |只看该作者
回复 10# xxzhang83
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发表于 2010-11-16 20:43 |只看该作者
个人觉得如果诱导转分化过程传代是不好的。首先,就是楼上的同学说的,无论何种诱导剂作用过程和胞膜生理活动肯定都是有关的,要么信号传递,要么是化合物的直接转运,要么是内吞之类。消化过程会影响胞膜生理状态。其次,如果传代种板了,最后的转分化效率如何计算呢。我做间充质干细胞转分化,转分化的细胞不见多,间充质干细胞却疯长,个人觉得首先应该在种板后待细胞铺板90%的样子就降低血清含量或尝试去除血清,我们的目的是让它分化,过多血清会让细胞生长过快。不过撤了血清不知道细胞生长状态会不会变差,有待尝试。
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发表于 2010-11-20 23:41 |只看该作者
回复 6# bypw
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  在做分化时,应注意铺板密度。如每个六孔板中加几十个小的克隆。
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