细胞是不是分化了？

askage

谢谢老兄的文章，很需要

askage

我做人脐带MSC培养，在原代或P1代后期也呈出现过“分化”现象。大多数细胞扁平，象银杏叶。因为细胞较少，无法流式检测，继续传代培养到P2，长到80%。这期间发现扁平的细胞减少了，密集的时候梭状感出来了。收集起来流式检测：CD29,CD73a、CD90,CD105,CD106,CD166,CD14,CD34,CD45,HLA-II,跟以前的一样,未发现哪个标志异常。（注，我们的流式检测和韩忠朝老师他们的检测结果唯一一个区别是CD106，他们报道是弱阳性，我看过他们的流式图，跟我们的图几乎是一致的，我们判断是阴性。当然，我们也是刚接触流式，可能出错。）

zhangl

MSCs传代后大的扁平细胞（增值慢）会增多，这是不可避免的，但在细胞密度在70%左右传代，可以减少大扁平细胞的比例（不要长滿了再传）。另外传代时细胞不能太密。如果大部分细胞都是扁平细胞了，那您就需要重新再提细胞了。因为有报道大扁平细胞虽然还具有分泌细胞因子的作用，但其增殖分化能力是下降的。

zhangl

传一篇文章供参考。

missyoudad

但是这种情况要怎样处理呢？

missyoudad

文献说传8-10代都是没有问题的吧。这才第二代啊？

missyoudad

是不是应该添加些抑制细胞分化的因子？还是调整接种密度？请不吝赐教。

gfzlee

回复 17# missyoudad 5 @) o- r) w0 A, }* N

7 n( f) G1 i1 _# x- e
9 t4 j9 o, t+ @    请问你细胞形状改变的问题具体原因弄清了没有，怎么解决呀？
- C3 n8 M- T; x/ R1 N
) J; ~* q) l- @" ~谢谢

helen841102

望得到答案

decloud2009

看你的细胞好像有好多小点点，换液的时候，旧的培养基里有黑色的小点点吗？