间充质干细胞的冻存配方

azzyou

回复 dwl1209 的帖子
, A3 l- B! P$ s
$ x+ p% C4 ?; s9 t冻存盒本来就是一度一度下降的，符合细胞冻存缓冻的要求，所以不用放在4度，再到-20度去过度了，直接放到-80度，再转移到液氮就行了。

Demon_CN

我刚做完冻存复苏实验，用的细胞是脐带间充质干细胞。
4 b5 s# F  d3 @8 C; A冻存配方10%DMSO+75%低糖DMEM+15%FBS
2 ^6 j. m; U, s' P7 R* x复苏形态很正常，活率在90%以上，补充细胞入液氮罐3天

帝国黑骑士

大多都是用DMSO:血清=1:9的比例做的，不过在你用之前提前几分钟配好，放冰箱里比较好一些。

bulu123

我一直用 dmem/f12:fbs:dmso=7:2:1 效果不错
& x; L- S  E; x/ s

漂泊的风

细胞冻存液的比例到不是绝对的，凭个人经验觉得培养基：血清：DMSO=4：5:1的效果比较好。

wangyimei

间充质干细胞的冻存，我们一般用培养基：fbs:dmso=5：4:1
5 i  x' \$ o( O- f加入好冻存液混合好后，然后用棉花包好，放入-80°冰箱过夜，第二天下液氮

chrismine

推荐试试7：2：1的比例试试，我们实验室一直都是这个比例

signext

BMSC. R- w/ s" i; D8 z2 M% c& C
我也是7：2：1  效果感觉不错
+ K! e8 W6 C* Y4 b2 s至于冻存程序，没有冻存盒，我是用棉花把冻相聚管包起来，扎紧，放到四度意思一下，待个十几分钟，－20度待个几十分钟，再投到负80，因为很快就用，就没往液氮里转，七个月之后复苏，70%以上的存活吧，生长良好，可见负80至少放半年没问题的。
6 ], Q1 W7 z- I/ z2 S% e% l关键词：慢冻速融嘛！