求助：生殖嵴的培养

deludeluboy

新手初来乍到。我养的是人生殖嵴PGC。克隆的样子似乎差不多。很密实，克隆的边界很清楚。7 I, N4 C2 g7 p3 [- R+ b6 y
但我认为比较重要的是要避免组织块贴壁，这样长出来的“克隆”周围有自己分化的成纤维细胞爬出来。解决办法就是剪碎组织后，0.25%胰酶消化，吹打，关键是要将悬液经滤网过滤，去除组织块。这样就可以保证长出来的不是组织块而是克隆了。而且饲养层太密了也不行，这样MEF也会鼓起来，看上去蛮像克隆的。MEF基本搭上边就可以了。老板说小鼠的PGC长逝要快得多，本人没养过。

简简单单

PGCs原代培养差不多就是这样，你的克隆还行。我的也是3-4d形态就很典型了。AKP染色会是阳性的，但是OCT4等多能性因子可能有些克隆是局部染上所以克隆是不纯，得继续培养下去。

大猪小猪落玉盘

看来都是高手！

majing217

我在做猪的的EG，原代培养的时候，我没有铺饲养层，直接取生殖嵴及边缘部分，用猪的胎儿成纤维细胞直接代替饲养层的作用，但是EG长的不是很好，我想问一下，有没有养过猪的原始生殖细胞的前辈，指点一下啊，谢谢) l! C2 S2 u; q# C

褚cell

回复 esc123esc 的帖子, G. ~2 B5 E+ R) A! @1 d" R

2 L1 f7 ~6 f7 {) r/ _+ h你可以在低倍的显微镜下用注射器针头剥离。注意在无菌条件下操作。要不容易污染。