求助，原代神经干细胞的具体步骤。

xfyang2007123

回复 10# huangfei2010 [/b了。看文献上胎鼠多是在解剖显微镜下取组织，不用显微镜的话估计就很难分出是那一部分

SVZ

以下建议，仅供参考：
+ x( R! M( G6 y9 {$ Z, \, _1。关于小血管：建议取材时一定要在显微镜底下仔细将脑膜和血管剔除干净, `1 H8 F, u4 b
2。关于组织片：建议用200目细胞筛过滤。也可用200目，400目双重过滤。
4 g2 d# e) S8 X: j/ K% F8 U3。传代换液建议半量换液，据文献报道全量换液易致分化。

xfyang2007123

回复 12# SVZ : \) b: R) g- V- O( P/ X
现在知道为什么半量换液了，原以为是怕细胞环境改变太快，适应不了呢。谢谢了。

jennyshy

回复 10# huangfei2010 3 ^& \4 I' {0 J$ {7 v
: U/ U) o9 [) Y6 L- }: L7 [8 V, B& `
& v# e1 N$ k' {2 A2 v9 z  j8 P
    是可以分清楚间脑一些东西的，16d的海马都可以看清楚的。我用14d的，只取了大脑皮层，中间的一些东西都去掉了。  R# U$ d+ t5 N$ }* ]9 m
胎鼠脑比较软，解剖时要耐心，慢慢来，否则就一片模糊了……

jennyshy

回复 10# huangfei2010 6 g: a8 J% J# E$ t

" f* C1 N. Z; h( E
6 y5 o! h4 V3 X    16d的大鼠胎脑的海马是可以看到的，也可以分离出来，我用肉眼分的，其他的部分我就看不很清楚，但是海马是可以看到的，而且小心取也能分得很完整。14、15d的胎脑，去掉间脑等等，把皮层留下就可以了，呵呵宁缺勿滥，
$ e' a6 b! \3 C+ e也有文献说把整个脑扔进去养NSCs的，不过只取14d胎鼠的皮层养，个人认为中脑内一些神经元会混入到你养的细胞里。