我养的大鼠骨髓间充质干细胞的图片，是老化了吗

大海

细胞没长满 提前传代有用吗 可以用吗 长80%-90%传代比较好

chendongbo338

你是不是在传代时，消化时间太久了，也会出现上面情况

小熊不杀生

你的细胞要长多久才能融合到80%-90%？胰酶消化时间多长？1 t: L. B& \! e" k: t& ?
我也发现密度大的瓶子，细胞不会铺的太开，不知道这和老化有没有关系？  T8 r0 f# o5 v5 B. ~% i5 k
我的是rabbit的 http://www.stemcell8.cn/thread-24534-1-1.html

feifei105

我冒昧的说句，我感觉你养的不是间充质干细胞，或者纯度很小，大部分是成纤维，所以很快老化，你做诱导实验了吗？

wsrz

我冒昧的说句，我感觉你养的不是间充质干细胞，或者纯度很小，大部分是成纤维，所以很快老化，你做诱导实验 ...
4 Z& Z! C8 ~2 q$ E2 ^- s( tfeifei105 发表于 2010-7-28 16:47

0 L! G$ q" e" ~) r恩，谢谢你的讨论。之前也有TX说是成纤维，所以老化。我还没做诱导实验，本想传代后才做。细胞养成这样，都没能传代，下面一步都不想做了

wsrz

你的细胞要长多久才能融合到80%-90%？胰酶消化时间多长？* k. Z. _+ L7 c2 b
我也发现密度大的瓶子，细胞不会铺的太开，不知道 ...
  k, C: C$ c; s7 |小熊不杀生 发表于 2010-7-28 08:23

; B8 f- f% _2 k  h) Y我的细胞大概5-7天，就成集落样聚集生长，瓶底的视野呈现出来就是这儿一片，那儿一片，细胞全部黏在一起，说实在话，我都搞不清楚有没有融合到80-90%。我最近消化过一次，胰酶消化时间4分钟，贴壁细胞几乎没动静，仅有少量细胞漂浮，我没敢继续消化，赶紧加了血清就传代了，离心后细胞很少，明天我再去看生长情况，估计不会很好

wsrz

你是不是在传代时，消化时间太久了，也会出现上面情况
! T: ~- G# T3 q, X/ K' `chendongbo338 发表于 2010-7-27 17:24

/ ]& p' L8 }) V$ d2 q, P+ L* J& s/ M5 @
恩，消化过度肯定对细胞有影响。我上传的图片是没有传代前，培养了7天左右吧，细胞形态就感觉不对了，养了好几瓶都是这样

chendongbo338

MSC传代多了，也会老化比，如到P6代就会出现老化，成纤维细胞就会多些，细胞量会下降很快。二到三代做实验最好，不知你为什么要养到七天

小熊不杀生

回复 16# wsrz
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   估计很难消化的就是成纤维细胞，我也遇到类似的情况，你可以把消化下来的收集起来，或者冻存，以备将来鉴定的时候用

zx19851985

我有试过BMSC在贴壁率90~100%后再接着养2天，就成为这种形态，老化的表现，所以也有可能是细胞密度太大所致的吧。还是要看你这7天的细胞变化确定了