如何从稳定的肿瘤细胞株筛选出相应的肿瘤干细胞?

shixiangguang

筛选出来的肿瘤干细胞可以稳定的培养吗？比如冻存、传代等，还有哪种筛选方法不会影响细胞的活性?一般来讲，从一株肿瘤细胞中筛出肿瘤干细胞需要多长时间？代价高吗？烦请各位高手前辈帮忙解答啊

细胞海洋

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renkq

shixiangguang 发表于 2012-6-6 11:14 ) l2 s7 ?+ Z( T& ~
筛选出来的肿瘤干细胞可以稳定的培养吗？比如冻存、传代等，还有哪种筛选方法不会影响细胞的活性?一般来讲， ...

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筛选出来的肿瘤干细胞可以稳定培养，冻存和传代，但是冻存时，需要用PBS洗一下，去掉DMSO，因为DMSO可以促进分化。从一株肿瘤细胞中筛出肿瘤干细胞，看你用什么方法了，如果用免疫磁珠，那就要扩增细胞到10的8次方，扩增细胞需要花时间，筛选也就3-4小时；如果只是干细胞培养液悬浮培养，就很简单。

shixiangguang

回复 renkq 的帖子
3 q9 w: r( N0 j# f7 C1 I" @0 F
, ]7 K& {4 \5 z% d+ ~& D感谢renkq的解答，我想问您个问题，肿瘤干细胞在正常的细胞系、不转移、低转移、高转移癌细胞系中存在的比例一样吗？我看过一篇CELL说EMT的细胞具有干性，如果我直接用肿瘤干细胞的分子标记抗体来检测EMT细胞标记分子的表达量而不用筛选，这样能做出来吗？不是说肿瘤干细胞的含量极低吗?但是EMT又有了干性这岂不是矛盾了？

shixiangguang

回复 renkq 的帖子  m$ X9 l, Y8 A, E8 c1 ~9 ^
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还有作为肿瘤干细胞的标记分子，这些分子对其干性又有何作用？或者说没作用？如果把肿瘤干细胞的标记分子knockdown会有什么结果？比如乳腺癌的CD44，肺癌的CD133等