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楼主: 上官鑫
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请教iPS诱导过程中的问题(有图)   [复制链接]

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优秀会员 金话筒 专家

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发表于 2010-10-1 22:27 |只看该作者
支原体极有可能在你的293T细胞上,这样你的病毒就带支原体3 i8 Z4 c# s- i7 q9 D9 w
带了Myc的细胞自然长势良好,只是你这个也不能算长势良好,只是能活能分裂罢了,要不然六天必然密到堆起来。如果有支原体是没有办法的,必须换细胞。不要幻想能除去支原体。/ \8 G' d+ l: e8 w* h
人的细胞代数大点没问题的,十代左右也就中等效率吧。MEF P4基本不行了。
  s" c# x/ C# I% T, F" B你ES培养基是用FBS吧,没有用KSR吧?一般来说就是用15%的FBS养。
: d) g, R: P; I$ ^. P2 R3 s5 O# ~% `0 [/ u
建议去找株干净的platE细胞,实在不行找一株干净的293,估计问题就能解决了。
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发表于 2010-10-1 23:00 |只看该作者
有道理,但是我用ES media单独养feeder,也是过两天就死了,用ES media同时养ES和feeder就能长的很好,很神奇。

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发表于 2010-10-2 22:44 |只看该作者
KSR对feeder影响特别大,LZ不是用它养的吧!我看见你的Feeder状态不是很好啊!
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发表于 2010-10-4 06:27 |只看该作者
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我KSR和FBS for ES的都试过

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发表于 2010-10-4 10:20 |只看该作者
代数应该控制在3代以内,media做一下test,并且过滤一下试试。
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金话筒 优秀版主

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发表于 2010-10-4 10:46 |只看该作者
建议:从买试剂开始,从头再来!!!!!!!
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发表于 2010-10-5 06:07 |只看该作者
media test了放培养箱n天都没有变化,也过滤了试过。我就是不明白feeder用DMEM+10FBS养就挺好的,一换成ES media就变差。
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发表于 2017-6-19 14:18 |只看该作者
关注:)

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发表于 2017-8-6 09:26 |只看该作者
楼主现在还做ips么
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