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楼主: ligangcw
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[请教] 低氧培养 如何控制氧浓度   [复制链接]

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发表于 2010-10-26 00:50 |只看该作者
实验室应该都有专一供低氧培养用的培养箱,你问一下你们实验室的老师,我们实验室的低氧培养箱好长时间久没人用过了,有些同学做元代时用过。
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发表于 2010-10-26 18:34 |只看该作者
我们这里直接叫充气公司按我们所需的配方配气的。
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发表于 2010-10-27 20:06 |只看该作者
其实不难啊,我就是用现在科里有的二氧化碳培养箱,然后让专门给科里配送气体的公司,讲好各种气体的百分比,他们会按照要求给你提 供的。
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发表于 2010-10-27 23:36 |只看该作者
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这个更好,简单实用,谢谢了

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发表于 2010-11-11 17:21 |只看该作者
谢谢这个论坛让我学到很多东西,希望自己了解的知识对楼主有些帮助。为了不违反版规,品牌名省去。& p' }: k+ o( p  [! E2 i- p2 A

# @5 d3 x6 @' s  c) e1 F% |/ [  O$ B* D( o如果你只是做个定性实验,比较低氧与大气氧浓度下的培养效果,用普通的三气培养箱或用预混合好的混合气瓶就行了,像thermo 31系列,贵点的像德国L公司(南方地区医院生殖中心用得多)。如果要做精确定量研究的话,这种大培养箱是不合适的(即使有的产品会标示达到0.1%),1)一般来说3%以下O2浓度,大培养箱技术上就达不到了。因为低氧需要冲入大量N2,箱子体积越大、要求氧浓度越低则需要气瓶给的压力也越大;2)每次开门后恢复时间特别长、耗气量吓人;3)精度差。用专门的O2浓度检测仪检测就会发现箱内O2浓度不稳定、浓度跟预期有差距。
; z1 G  R6 i! Z8 q8 i- K2 R, h. ^- V9 B: z8 [2 Z1 n0 R: \
如果对气体浓度控制要求很高的话,推荐美国B公司的小型气体控制器。体积小省气、精度高。产品采用细胞培养chamber设计,可放在普通培养箱内,只需普通培养想提供温度,不影响其他细胞培养。由于体积小,外接专门气体控制器、气瓶就能精确控制气体浓度,O2可控范围0.1~99.9%,从大气O2浓度到0.1%只需10min左右。
0 v' V  }4 R9 y) u" h$ ?- B' @. i% t7 u
低氧培养现在是个热点,因为更接近机体特定组织器官内环境或能模拟特定疾病模型,此外也有报道低氧能提高囊胚率,Yamanaka也报道过低氧环境能提高ips细胞获得效率。
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发表于 2010-11-15 10:40 |只看该作者
三气培养箱 美国 NUAIRE AU-4950

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发表于 2010-11-15 14:24 |只看该作者
提前让送气的公司把氧气,二氧化碳,氮气按照一定比例混合好之后送过来直接用就可以了。另外,如果没有培养箱的话你可以买一个hypoxic chamber--低氧小室(其实也就是一个密封的小塑料容器)。stem cell公司有卖的,价格1w左右(说实在的,我真不觉得它值这么多钱)。每次用的时候把气体充满,然后密闭好,放到我们平时用的培养箱中培养就可以,期间如果培养的细胞多的话还需要间隔性的充气体。
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发表于 2010-11-16 15:16 |只看该作者
本帖最后由 hawkyiger 于 2010-11-16 15:19 编辑   k4 w- E) n+ i
2 e( x+ a4 ~! V2 ?8 ^
回复 12# cony 7 \3 I$ w% u% e% C) q
. k# h; k, x% C
能不能具体介绍一下啊,我的问题:1. 直接配气的话是否对气体的消耗量过大
8 b, E6 A& Q0 d! O2. 虽然不要很精确,里面氧气的浓度保持的是否平稳
$ U' r# U, Z3 v) X3. 配气是指单独的一个罐还是两个罐:氮气氧气罐和二氧化碳罐
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发表于 2010-11-17 08:24 |只看该作者
回复 13# 2006goodluck

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发表于 2010-11-17 08:25 |只看该作者
回复 13# 2006goodluck ( @" q, V4 J( U

+ }" O" A1 a8 A    同样的问题:1. 直接配气的话是否对气体的消耗量过大
, j6 t- H* y8 v2 `7 P; F% G7 K2. 虽然不要很精确,里面氧气的浓度保持的是否平稳
( Z0 j- n9 R0 U! G8 |& I* k3. 配气是指单独的一个罐还是两个罐:氮气氧气罐和二氧化碳罐
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