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楼主: ligangcw
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[请教] 低氧培养 如何控制氧浓度   [复制链接]

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帅哥研究员

11楼
发表于 2010-10-26 00:50 |只看该作者
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实验室应该都有专一供低氧培养用的培养箱,你问一下你们实验室的老师,我们实验室的低氧培养箱好长时间久没人用过了,有些同学做元代时用过。
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12楼
发表于 2010-10-26 18:34 |只看该作者
我们这里直接叫充气公司按我们所需的配方配气的。
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13楼
发表于 2010-10-27 20:06 |只看该作者
其实不难啊,我就是用现在科里有的二氧化碳培养箱,然后让专门给科里配送气体的公司,讲好各种气体的百分比,他们会按照要求给你提 供的。
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14楼
发表于 2010-10-27 23:36 |只看该作者
这个更好,简单实用,谢谢了

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15楼
发表于 2010-11-11 17:21 |只看该作者
谢谢这个论坛让我学到很多东西,希望自己了解的知识对楼主有些帮助。为了不违反版规,品牌名省去。
& W' I6 s( N( ^1 _; ~6 ^  J/ K
, ]$ }) d2 @. a如果你只是做个定性实验,比较低氧与大气氧浓度下的培养效果,用普通的三气培养箱或用预混合好的混合气瓶就行了,像thermo 31系列,贵点的像德国L公司(南方地区医院生殖中心用得多)。如果要做精确定量研究的话,这种大培养箱是不合适的(即使有的产品会标示达到0.1%),1)一般来说3%以下O2浓度,大培养箱技术上就达不到了。因为低氧需要冲入大量N2,箱子体积越大、要求氧浓度越低则需要气瓶给的压力也越大;2)每次开门后恢复时间特别长、耗气量吓人;3)精度差。用专门的O2浓度检测仪检测就会发现箱内O2浓度不稳定、浓度跟预期有差距。( @; a7 R# G' J; X  i6 J; q/ k

( ]1 d# J; k" [6 M1 w+ d如果对气体浓度控制要求很高的话,推荐美国B公司的小型气体控制器。体积小省气、精度高。产品采用细胞培养chamber设计,可放在普通培养箱内,只需普通培养想提供温度,不影响其他细胞培养。由于体积小,外接专门气体控制器、气瓶就能精确控制气体浓度,O2可控范围0.1~99.9%,从大气O2浓度到0.1%只需10min左右。1 P2 o8 w2 m, a$ _! X4 w% N( K
5 \, v; j$ Y( B4 c* s, }8 |
低氧培养现在是个热点,因为更接近机体特定组织器官内环境或能模拟特定疾病模型,此外也有报道低氧能提高囊胚率,Yamanaka也报道过低氧环境能提高ips细胞获得效率。
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16楼
发表于 2010-11-15 10:40 |只看该作者
三气培养箱 美国 NUAIRE AU-4950

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17楼
发表于 2010-11-15 14:24 |只看该作者
提前让送气的公司把氧气,二氧化碳,氮气按照一定比例混合好之后送过来直接用就可以了。另外,如果没有培养箱的话你可以买一个hypoxic chamber--低氧小室(其实也就是一个密封的小塑料容器)。stem cell公司有卖的,价格1w左右(说实在的,我真不觉得它值这么多钱)。每次用的时候把气体充满,然后密闭好,放到我们平时用的培养箱中培养就可以,期间如果培养的细胞多的话还需要间隔性的充气体。
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18楼
发表于 2010-11-16 15:16 |只看该作者
本帖最后由 hawkyiger 于 2010-11-16 15:19 编辑 1 E& W; u  L+ }2 c

% d# V. z% ?0 ^& H0 M回复 12# cony 6 A/ f* K; X  @1 @8 r- j5 f

) \7 {2 k& C) {) y7 E能不能具体介绍一下啊,我的问题:1. 直接配气的话是否对气体的消耗量过大+ K+ m2 f; y! p2 q/ R5 [; q
2. 虽然不要很精确,里面氧气的浓度保持的是否平稳* [9 b/ Y; q9 t+ K
3. 配气是指单独的一个罐还是两个罐:氮气氧气罐和二氧化碳罐
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19楼
发表于 2010-11-17 08:24 |只看该作者
回复 13# 2006goodluck

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20楼
发表于 2010-11-17 08:25 |只看该作者
回复 13# 2006goodluck $ q) F6 L9 `2 R  I. ?; e

  k9 j, ~) G, y+ F( j+ G    同样的问题:1. 直接配气的话是否对气体的消耗量过大" k$ n' H! w3 w
2. 虽然不要很精确,里面氧气的浓度保持的是否平稳
$ {' C) z* [4 S- ?; m% j. U! `3. 配气是指单独的一个罐还是两个罐:氮气氧气罐和二氧化碳罐
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