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楼主: xiao6tao	go [请教] 胰酶中加EDTA什么作用？ [复制链接]

andyz0922

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11楼

发表于 2010-11-19 01:01 |只看该作者

直接用胰酶吹打细胞不好吧  再说最好还是离心3 m6 ^4 L: P4 Z: W4 G+ X
虽然你后加的培养基中会带有血清去竞争终止胰酶对细胞的作用0 d& U1 j0 _/ R* A/ q$ P
但个人感觉还是别冒这个险  & P0 R- ~/ _( I
实验千万别怕麻烦越怕麻烦越麻烦  个人经验仅供参考

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xiao6tao

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帅哥研究员积极份子

12楼

发表于 2010-11-20 11:03 |只看该作者

佩服，谢谢！

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xpzhang4736

新手上路

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13楼

发表于 2011-4-5 18:39 |只看该作者

回复 hawkyiger 的帖子' Y2 n: u' j0 d$ ^# [6 F3 M4 t' M

可以加入胰酶抑制剂终止胰酶消化？

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Temin

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14楼

发表于 2011-4-5 21:04 |只看该作者

综合一下前面几位朋友的问答：) z+ B- w1 \5 c% }
1、胰酶(Trypsin)消化细胞是通过水解细胞间的蛋白质从而使细胞离散，其消化不同的组织或细胞作用时间不一样，有的只需要几十秒，有的却需要十几分钟。Trypsin消化细胞的活性还和浓度、温度有关，在pH8.0和37℃时，Trypsin的作用能力最强。
2、Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制Trypsin溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+ 的HBSS或者纯净水(调节pH7.4)，并且加入EDTA耦合金属离子。/ @0 U* L# } n* B
3、终止消化时，加入含有血清的培养基即可，因为血清中含有许多肽类小分子和蛋白质。