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楼主: cherrydeng2006
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求助:细胞复苏问题   [复制链接]

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发表于 2010-11-25 16:51 |只看该作者
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发表于 2010-11-25 18:50 |只看该作者
回复 4# cherrydeng2006
" t4 X" D" @( A3 O& ]' c' g7 Z' a# E( B; |

/ t  {, [! s7 I( b  }1 O+ {8 l* e3 l  D    看了你的操作步骤,应该没什么问题
( ^( r( @+ d; X4 N0 |. X: D( E! u要是非有问题的话
: b* J) }& s' Y& v0 G4 D1.吹打50次,我个人认为吹打有点多了,可能有点过度了,过度吹打对细胞还是有影响的,我原来就出过这个问题导致细胞生长不好,我们一般是10次左右就足够吹散了;* J& P; q* w. i# \5 U; i
2.运输后虽然干冰还没化,但也不排除运输时间太长了引起细胞问题,毕竟液氮中-180度和干冰的-60度还是不一样的;, S8 p  _7 q7 N- c& T' ]' q8 V
3.厂家卖你的时候细胞生长状态就不好,你可以给厂家打电话要求更换细胞的。
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发表于 2010-11-25 20:45 |只看该作者
一般来回吹打10次左右哦!吹打50次蛮夸张的!呵呵!
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发表于 2010-11-26 13:35 |只看该作者
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发表于 2010-11-26 14:14 |只看该作者
对,吹打次数太多对本来就刚复苏的细胞造成了机械损伤,而且离心速度是不是偏低了些,我们通常都是1200-1500 rpm的
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发表于 2010-11-26 14:16 |只看该作者
谢谢各位前辈的指导!& B+ {$ L' h+ Y' y/ w
我准备再按照正确的方法试试。
4 D: B% d6 u) ?* u! u" k
4 I; t0 `- u0 N7 ]还有个问题,多大的转速比较好呢?有朋友告诉我说 ...+ H; W, j: ^. R0 |( u
cherrydeng2006 发表于 2010-11-26 13:35
' C; Q' B* q) |+ R9 F% Z% L$ H! \
6 N' i/ N2 J* W/ E
( c" U" T/ @$ }( [8 P+ @. m
    无血清培养基不是完全培养基不影响复苏效果

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发表于 2010-11-30 10:25 |只看该作者
吹打的次数多一些,但只要温和一些,对细胞的机械损伤应该不是很大
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发表于 2010-12-1 09:23 |只看该作者
要是实在吹不散 怀疑你的细胞冻存前就不好,细胞死了才会有团块的。
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发表于 2010-12-1 10:06 |只看该作者
是不是解冻的速度不够快,时间太长,最好是在水浴里一分钟之内解冻
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发表于 2010-12-1 10:07 |只看该作者
也有可能是细胞本来就有问题
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