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培养皿中细胞达到 80 %汇合后更换成脂诱导培养液(H-DMEM 培养液 ,10 % FBS , 地塞米松 1uM , 胰岛素10uM , 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,IBMX 0.5 mM ,吲哚美辛 60uM),每3天换液一次,诱导3周。( r+ Z/ p: p, m K2 q" e$ f) x$ f
也有文献上用的培养基是:L-DMED 或 a-MEM,如果不差钱的话,建议直接用商品化的脂肪诱导培养基,好像是2000-3000元一瓶,比较省心。( C' {9 L, o3 n g8 N
地塞米松起主要诱导作用,但个人感觉胰岛素的浓度也很重要,以前用10 ug/ml 就诱导成功。
7 |. f8 A# P7 N- O& n: A4 [祝你实验顺利! |
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