神经干细胞的传代吹打是否吹达成单个细胞

平平淡淡

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1 ?+ B/ G, ]/ ~
- s/ F1 z( |% ?6 Z; t我都尝试将近半年时间了，可细胞只能原代不能传代，耗下去要不少钱来养细胞，没办法只能用原代做了。

平平淡淡

回复 xfyang2007123 的帖子7 U6 G7 R2 q( j$ h+ }

# K* ]/ q+ O* D" \请问你们实验室有人可以传代吗？为什么我的就不行。

平平淡淡

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4 x8 X& l! T  v7 }6 L+ ?' i9 S" L& m) n
请问你具体是怎么吹打的？可以传代吗？

have-a-rest

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* ~2 s$ |. E* S( y
6 j, X3 T' U7 n+ v' S9 j8 y' s$ I悬浮的，收集到离心管，静置5分钟，轻轻洗去上清，加新鲜培养基，移液枪来回轻打2次。

jfy505

做了几个月神经干细胞，一直都是用机械吹打法在做神经干细胞传代，以前是传代的时候比较容易贴壁分化，悬浮的球也有，就是传代培养后总体细胞增加的不多，经常要原代取材，最近两次出现一个问题，就是用机械吹打法传代后，细胞不成球了 ，也不见分化，都是成单细胞状态，希望高手指点一下。

平平淡淡

回复 jfy505 的帖子  F( p0 z- D0 h

1 l! r9 U6 S- o我也养了好几个月的神经干了，也是机械法传代，但传代后细胞就长不起来。老是原代培养，很郁闷！！！

cyumin123

回复 xfyang2007123 的帖子& u0 p: {8 ?* ^( Y& \% z3 M% d1 _- L

2 E! E7 h! T  H8 @我们是一直用的原代细胞做实验的，传代方法一直没建立好。这样感觉细胞很浪费，做一批实验就得做一次原代，很郁闷呢~~~

cyumin123

我们在做的过程中有吹成单个细胞，继续培养有形成球，但是后来又不行了，就一直是单个，不形成球了，吹成单个的话个人认为吹打力度很难控制的，胰蛋白酶消化要加血清终止，又怕分化，所以徘徊着呢~~~

momocha1985027

请问高手，我的干细胞在0.125的胰酶消化2分钟后吹打，用的是巴氏管，仍然只能吹打成较小的团块，并且诱导了5天都没贴壁，且细胞状态也不好了，不如之前的细胞那么圆润，看着干巴巴的，请高手指点下，这是怎么回事啊？

esc123esc

如果是做培养的话最好不要吹成单细胞，消化也要尽快，到3,4个细胞的小集落比较好，单细胞容易分化~