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angelyannan

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楼主

发表于 2010-12-3 19:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请问小鼠神经干细胞的复苏率最高是多少？有没有相关冻存和复苏的protocol？怎样能提高复苏率呀？谢谢了

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沙发

发表于 2010-12-6 13:33 |只看该作者

我的冻存液配方是从丁香园学来的，效果还挺好的至少大概有80%以上

完全培养基+5%BSA+10%DMSO
) j( c5 |" |$ {: e) q
我用梯度降温4℃ 10min，-20℃，1h, -80℃过夜，第二天转入液氮长期保存
复苏时最好离心一下，然后用预热的培养基重悬，种入培养皿。2-3d后半量换液

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angelyannan

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藤椅

发表于 2011-3-5 11:57 |只看该作者

回复 jennyshy 的帖子
; B4 K' g8 L# V& V# A: Q1 X
添加BSA是容易促进分化的吧？请问冻存时单细胞冻存还是神经球冻存？神经球冻存的话直径为多少的时候冻存？你冻存的细胞是第几代的细胞？单细胞或者神经球的冻存密度是多少？，复苏后的细胞接种密度是怎样的？真的要做起来的话问题还是蛮多的。可否帮忙回答一些行问题？谢谢。