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楼主: 张也行
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[请教] 最近实验室提质粒时遇见的怪事,请教大家一下 [复制链接]

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发表于 2010-12-28 16:39 |只看该作者
回复 张也行 的帖子/ O% x! c8 o8 K  ^& f* N# V; b0 m! C
4 y& s; l: H& [: T4 r
我认为最大的可能你的菌种保存得不好,或applify的时候摇丢了,查查你的抗性筛选是不是对:是否有效,浓度等等。有时候筛选失效了杂菌会长过克隆的。用陪好的EtBr buffer 对质粒做一个梯度浓度稀释,再定量和marker做比较。不用跑胶上UV,也可以大概知道所提取的质粒的浓度,至少可以知道有没有提取出来。但不能了解大小和准确纯度。
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发表于 2010-12-28 18:03 |只看该作者
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7 p. b& v& o! _" y7 _% V9 l& M: ^0 a  J! R# P
是的,RNA特容易降解!我们跑电泳看到DNA前面有些亮带,今天测了一下OD,变化不大。不过有一些白色沉淀出现,以前大提时也有发现,估计蛋白未除净的缘故!
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