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求助:兔骨髓间充质干细胞的鉴定方法   [复制链接]

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包包
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发表于 2011-3-31 20:45 |只看该作者
这个当然要慢慢摸索了 可以先参照说明书 进口的抗体可以少用一点 但是国产的不要少用啊  你要做流式细胞学鉴定细胞 当然细胞的个数不能少了 7 X, r3 ]/ d! l$ \5 _
4 n1 Q) V& H0 [- H; t0 V( i
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发表于 2011-3-31 22:59 |只看该作者
关于兔骨髓间充质干细胞培养的方法,可以先考虑参考下中文相关文献(有SCI的更好)了解大体步骤,我这里附了2篇中文的,都是基本的兔骨髓间充质干细胞的分离培养鉴定方法3 w# N: L, J; a; ]! l# y
关于FCM分析,细胞量和抗体量最好摸索下,由于量的问题出现假阳性和假阴性就不好了。我们做人的MSCs一般不少于每管100000个细胞,当然说明书上如果附有每管多少个细胞就按照说明书上来。
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发表于 2011-3-31 23:00 |只看该作者
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优秀会员 金话筒

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发表于 2011-4-1 08:41 |只看该作者
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没看出来你是要用什么方法。流式细胞术和免疫荧光都是可以做的,但你要注意买的抗体是用于什么的,一般用于免疫荧光的做流式效果不怎么样,有可能假阳性。用于流式的一般说明书上会告诉可以用于免疫荧光。; R( S8 `6 @1 r/ l9 R8 C
% a+ A/ a1 _5 ?! I! @5 J
不过,间充质的鉴定不能但靠一两种抗体,一两个标志就能说明问题的。如果经济条件允许建议多测几个指标,如CD105,CD29,CD90,有时候可以看一下CD166,这些用流式做是比较简单的。
- O( T+ [* I6 f( ]$ I8 [0 F' n" @3 \6 C; N0 }$ L7 B
最好加一个波形蛋白的免疫细胞化学检测。
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