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楼主: angelyannan
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[请教] brdu阳性细胞   [复制链接]

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11楼
发表于 2011-3-30 09:18 |只看该作者
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回复 dxb1985 的帖子
9 X3 E: [1 P3 M! J1 @' R  t4 W' T. |
看起来一部分细胞核是着色了的呀,请问为什么一抗没有进入细胞核而核却又着色呢?胞浆着色是怎么回事么?是一抗没有清洗好么?怎么能让胞浆不着色呀?
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12楼
发表于 2011-3-30 10:05 |只看该作者
回复 angelyannan 的帖子
& i; A/ t( L3 w+ i1 X' ], g$ Z6 _  j/ o* |8 f) e" i  |' J
这就不知道了,嘿嘿,我给你看看我以前联系时做的吧

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13楼
发表于 2011-3-30 10:06 |只看该作者
回复 angelyannan 的帖子
. ~( a; u$ }) s5 H# j" j  |" h) y$ r& e
总觉得你的背景不对

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14楼
发表于 2011-3-30 20:14 |只看该作者
回复 dxb1985 的帖子
6 U0 \: ?  c! X) k
0 z. f& D  f2 Q. b谢谢啦,我再试试

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15楼
发表于 2011-4-1 09:24 |只看该作者
按照我的理解,胞浆着色是正常的。
2 ~, S2 c. H3 O9 v3 M7 _( b# `  |0 N: l" }' d6 Q$ A# h
因为,Brdu标记的DNA,而一般大家认为的DNA是在胞核里的,但是,线粒体里也是有DNA的,所以也会着色。在Brdu标记时间不长的情况下,胞浆里的颜色会重些,随着细胞分裂的进行,胞浆和胞核的Brdu含量都会降低,那时候可能只能看到胞核着色,或者都不着色了。$ C6 s4 L  v: N& I; v

+ T5 W1 t; e. }4 q% C6 G所以,用Brdu标记应该考虑一个时间的问题。时间过长可能出现假阳性,时间太短就会出现你刚才说的问题。
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16楼
发表于 2011-4-1 09:28 |只看该作者
顺便说一下,你要把你图片的放大倍数说清楚,要看核的着色最好用×100或者更大,低倍镜或者更低是难以说明问题的。现在这张图片就看不太清楚着色的究竟是胞核还是胞浆。
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17楼
发表于 2011-4-1 12:13 |只看该作者
回复 dyg108 的帖子! F! H: o4 U0 ]: {5 }3 u+ U$ |
+ x- `1 r: c! s# t
好的想,谢谢提醒~

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18楼
发表于 2011-11-25 19:12 |只看该作者
回复 angelyannan 的帖子& |! D2 w$ m7 G" x

# O. Z4 l2 I6 o% i9 M0 Q( ~楼主同志,怎么没有后续解答了呢,要善始善终嘛,你后来是怎么解决的呢。我也要做这个实验了,嘿,请教下经验呀!
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19楼
发表于 2011-11-26 09:10 |只看该作者
回复 shuicaoxi 的帖子
  D, l+ k/ i7 Z; X3 F. Y6 ]2 \$ d7 |# [/ ^, M  X
我的主要原因就是盐酸处理没有把握好,现在我的是2N盐酸处理25min左右(37min),效果还可以~不过这个处理时间还要根据温度变化有所调整,这个还得你自己摸索自己的条件了~
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20楼
发表于 2011-11-26 09:44 |只看该作者
回复 angelyannan 的帖子0 |: a/ R) J+ Q; f: l6 P
6 X3 b4 o& t" e
哦,好的。多谢你的经验分享哈!多问下,2N盐酸就是2mol/L盐酸吗?
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