brdu阳性细胞

angelyannan

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6 |3 Y$ Y( p  [7 n6 ^' {+ _看起来一部分细胞核是着色了的呀，请问为什么一抗没有进入细胞核而核却又着色呢？胞浆着色是怎么回事么？是一抗没有清洗好么？怎么能让胞浆不着色呀？

dxb1985

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; G  J, ?4 j! o: J, o7 o% n这就不知道了，嘿嘿，我给你看看我以前联系时做的吧

dxb1985

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$ G5 z' l; C2 |' z/ p
总觉得你的背景不对

angelyannan

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: d$ {7 I; G) F0 s1 f' M/ z8 K' B8 D& a& K$ I
谢谢啦，我再试试

dyg108

按照我的理解，胞浆着色是正常的。* p4 V9 x$ g. ^1 u* b9 C6 \: r
) V( T4 K' }/ ]; S, C
因为，Brdu标记的DNA，而一般大家认为的DNA是在胞核里的，但是，线粒体里也是有DNA的，所以也会着色。在Brdu标记时间不长的情况下，胞浆里的颜色会重些，随着细胞分裂的进行，胞浆和胞核的Brdu含量都会降低，那时候可能只能看到胞核着色，或者都不着色了。3 ~; O7 p1 b2 T& a5 h

/ I2 a# a! Q, [9 Q: K7 W+ d所以，用Brdu标记应该考虑一个时间的问题。时间过长可能出现假阳性，时间太短就会出现你刚才说的问题。

dyg108

顺便说一下，你要把你图片的放大倍数说清楚，要看核的着色最好用×100或者更大，低倍镜或者更低是难以说明问题的。现在这张图片就看不太清楚着色的究竟是胞核还是胞浆。

angelyannan

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& D; W' P9 \/ O9 x7 }7 m. |/ g! q$ q- V' Q8 y! W  _+ R
好的想，谢谢提醒~

shuicaoxi

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* z; A  ?# Z4 {, ?" o+ R7 P2 |) ]; n$ A$ s" z  R- \2 j* ^- _
楼主同志，怎么没有后续解答了呢，要善始善终嘛，你后来是怎么解决的呢。我也要做这个实验了，嘿，请教下经验呀！

angelyannan

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$ y: Y$ U3 D+ W& F2 n- z% {
0 |/ t% K; H7 a& E( t1 d我的主要原因就是盐酸处理没有把握好，现在我的是2N盐酸处理25min左右（37min），效果还可以~不过这个处理时间还要根据温度变化有所调整，这个还得你自己摸索自己的条件了~

shuicaoxi

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哦，好的。多谢你的经验分享哈！多问下，2N盐酸就是2mol/L盐酸吗？