干细胞传代中的问题

sarah19860420

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那一般要多久才能消化开呢？我看了楼上的帖子说是用枪刮细胞，那证明也是没有把细胞消化开吧。

sarah19860420

回复 michaelgibh 的帖子1 \& V; l) K' D% X
; F$ s# U2 Z" r- U( t
您好，我用的胶原酶IV进行消化。我想问下你所说的用枪头刮细胞，是不是也证明他并没有完全消化开。是用机械力将其分离开。那样会带有一些MEF，对吗？

ilovelife

真是学习了，谢谢大家的宝贵经验和分享。

michaelgibh

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9 z+ Z6 Q, T" h. S- Y  ]奥 原来我们用的是不同的方法 我们用的培养基不需要饲养层细胞 而是用metrigel包被 所以不会有MEF

sarah19860420

回复 michaelgibh 的帖子
& e& n0 {) y- f
7 d  D# t) V2 P4 _% L5 e% }# J哦，原来如此

YLL824WAN

回复 michaelgibh 的帖子5 r% V: _  A9 K3 \& ], `. x

* m% \' r  m3 J' w& h你好！我也是刚刚订了mTeSR的培养基，还打算做MEF饲养层呢！请问一下，这个培养基是不用MEF饲养层的吗？那个metrigel是不是跟培养基配套的？还是要单独买呀？多少钱？谢谢指点哦！

michaelgibh

恩 对 是配套的 不用饲养层培养 用metrigel即可 需要单独买的 至于具体信息 可以去stem cell 公司网站上去查 我也不知道多少钱 我们实验组有人专门负责订购试剂

YLL824WAN

回复 michaelgibh 的帖子! }5 {1 ~5 |- F
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但是iPS生长不是需要MEF释放一些生长因子吗？不用MEF的话，metrigel可以满足吗？你们的iPS状态怎么样？会不会有影响呢？

michaelgibh

回复 YLL824WAN 的帖子: H/ h" N. p# C" H

* M* K, u& C. K( b所需要的生长因子全部由mTeSR来提供，metrigel只是用来帮助它贴壁的。这是世界上应用最广泛有效的培养方法。我们用这个培养的很好。stem cell 公司已经推出mTeSR2，与mTeSR1一样也是defined，只是不含动物蛋白，将来若ips用于临床还需这种培养基。

YLL824WAN

回复 michaelgibh 的帖子8 R4 L4 l& R. ^$ K0 w& a

0 H& s2 k: B+ Y谢谢啊！好人……真是帮大忙了，感激不尽哦！呵呵