如果细胞一直长着不传代会怎么样

jj2570782

皮搋子 发表于 2011-4-7 08:50 $ H7 z( ]; i5 h4 Y. g8 _0 X" q$ Y4 w
这种等着其他细胞死掉而留下干细胞的情况是几乎不可能发生的。% c8 G7 |( x4 P2 Z1 B6 ~
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首先，你的细胞到底是不是干细胞不能通过 ...

- p: u7 A; v) l( `* v* Y弱弱的问句，我也养的MSC，怎么分层啊？

jj2570782

光风霁月 发表于 2011-4-7 10:18
7 \& c" n3 f" k+ F间充质干细胞可以经过贴壁分离方法逐步纯化。原代中混有杂质细胞比较多，所以你的培养中细胞比较多，一部分 ...

0 `8 m9 J, L% r  v/ |; C请问光风兄，您具体是怎么控制胰酶消化时间的呢？是不是MSC贴壁没有成纤维细胞贴壁那么牢固呢？我也在养rBM-MSC，现在很纠结怎么纯化！望能指导指导小弟！

gaorongbest

还没见过细胞养4到6周的呢，一般间充质培养3-5天就可以传代了，不然细胞就没有空间继续伸展了，而且间充质细胞可以传很多代，这样就一步步的纯化了，多看点相关文献，学习别人的纯化方法。

starlancer

恕我直言，这种思路不是很对。死细胞会对活细胞有很大的影响，所以要尽量去除死细胞。另外，细胞长期不传代的话会凋亡或者发生不可逆的损伤。所以分离干细胞关键要纯化。其实话又说回来，如果有少量一同分离的细胞可能对干细胞的生长有支持作用。但不论如何肯定要传代的。

zhangyan813

天啊，居然还有人这样养细胞。赶紧把你的细胞重新用酶消化起来，重新利用差异贴壁的方法分离，纯化，然后诱导分化试一下，如果分化不了的话，我建议你重新开始原代培养吧。
9 V# |. u6 e; u6 I$ v另外，不知道你看的什么文献，如果是中文的我建议你不要全盘照做，还是多看看英文的分数较高的文献。

临床干细胞

谢谢各位的解答，我按自己的经验也是应该传代了，可看全文没有提到passage的字样，而且说了是四到六周后其它细胞都死光了，只剩下比较单一的胞型的细胞，我的老师也不太懂，他认为应该直接养

临床干细胞

jj2570782 发表于 2011-4-7 14:00
: g3 g) V, j* }请问光风兄，您具体是怎么控制胰酶消化时间的呢？是不是MSC贴壁没有成纤维细胞贴壁那么牢固呢？我也在养r ...

; H- W* l) c; v* s; Q3 p
MSC我的感觉贴壁还是比较牢的，一般是等到80％时才传代，你看是不是生长因子有些问题还是长的时间不够