关于间充质干细胞传代过程中干性维持的问题

zhangl

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, O$ s  l* P/ y# J( r% `4 }! J# s
有两个问题再次请教：# R1 C$ T* @# l6 y1 `
1、你们的MSC的来源？$ t9 s& M* z; o- t: Y0 {8 k
2、如果方便的话可以告诉两个生因子的产家或货号吗？你们不加FGF吗？1 C# d, x! B" t' [/ L: a0 j( E
多谢

木木ly

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& U6 |/ E! _" z: [
不好意思，加的，笔误，是bFGF 和EGF，都是pepro tech公司的

a7625935

我們實驗室會將L-DMEM調製PH7.2-7.4後加入FGF及EGF後再培養,會發現B6老鼠msc長的很好且生長速度加快

牙牙丫丫123

建议使用的酶较为柔和一点儿，或者在培养液中加入bFGF、EGF等生长因子，另外换成低糖培养液可能好一些

Learner

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( j4 T; e+ P& }% B( L7 w: R; ~9 n4 Q) A
太贵了！

zhangl

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, |" T: [" M6 Q8 ]6 L! Y% D8 a9 V5 B9 c% }0 r8 V
能告诉你们加的因子的具体深度吗？

zhangl

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/ x: M: h" G0 r' E- Z# X- m+ V能介绍一下你们所加因子的具体浓度吗？还有血清浓度？十分感谢！

骨道边

新手上路啊，请问一下大家，文献都是用α-MEM或者L-DMEM这两个有什么区别吗？我五一前就试用后者来养，今晚去换液的时候看的情况好像也没有贴壁生长的样子。求教，谢谢了

hygene

zhangl 发表于 2011-4-29 10:09 , i4 B4 v! O' F& D$ w- S! S
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  [# v1 u* k( X8 L. M* t. f7 K
5 t$ ~0 a0 {' t6 y% ^& B5 ]6 {能介绍一下你们所加因子的具体浓度吗？还有血清浓度？十分感谢！

- v" S# f; D/ H+ V
bFGF、EGF都是10ng/mL，胎牛血清浓度10%

哇牛

我们实验室用的只用a-MEM培养液+胎牛血清，里面不添加任何bFGF、EGF，MSC已经传到了12代了
! y6 b9 r! _: q刚开始我用的培养液是DMEM/F12，但是老师说DMED/F12里面含有的一些成分在后期会促进细胞分化（具体哪些成分，我也不是很明白，只是看的FBS里有成分可以促进细胞分化）
. O$ P$ `; U# s; G& c1 @3 H氢化可的松：血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化可的松
: m) L. E  A+ C0 b，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。- U# y( |2 `8 a2 C& ^" N( G

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