关于MEF的生长状态，求分析

cortex

出现这种情况，一般是PBS多洗几遍，双抗浓度加倍，可能可以短暂控制，但是，正常浓度双抗时，还是会出问题，建议你按照前面楼上所说，把细胞仍掉吧，自己重新做。最好把培养箱好好消消毒。在显微镜下能够看到的，不是支原体污染，因此，你用抗支原体的药，好象不太对症？

cortex

0.25%胰酶消化问题也不是很大。但是细胞消化起来后，赶紧用带血清的培养基中和，应该没问题的。如果消化时间长了，当然会影响细胞的状态。如果你要稀释，可以用PBS进行。

sheepthief

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' N# L: U3 E$ O+ I, q+ V4 b6 F4 O/ }* I. \7 v; V4 U- C
0.05%胰酶的配置方法：. S: w; w8 l3 j
10ml 0.25% 胰酶/EDTA
* ?% G( X9 {- B4 V1 d- v40ml 无钙镁的PBS，二者混合到一起就可以了。- H" X7 R. Z6 @! G
可以10ml分装，4摄氏度可存放1周，零下20摄氏度可存放6个月。

sheepthief

一定注意避免反复冻融

573639471

回复 cortex 的帖子
1 E7 g, W& W# r/ x4 Q8 F1 R  r1 t$ x# E5 S
从照片上看，您您觉得 黑东西是可能是什么污染？

573639471

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$ R5 O; M9 J* S9 Q* K4 K
  l( |9 B; B  s0 w- r$ i. i很感谢 详细的回复

nculsa747

回复 sheepthief 的帖子" j! P, v9 o, |5 _5 i9 g& |+ n7 N

$ ~3 p& t" H: K3 k# F扯，用0.25%传代一样可以。可以用PCR的方法来进行检测，看我的帖子，已经发了支原体检测方法。

wangyimei

和我做的MEF形态差不多，至于说的污染照片上是没有看出来，有哪位前辈做过能否给指导一下这样的细胞形态是不是没有问题啊

573639471

回复 黑眼豆豆 的帖子
6 g1 g5 i" H" T3 v1 w/ r) g* |4 F4 \& g/ h, Q/ B; L6 V
你的mef有黑点吗

mike19840320

遇到过，比较少的话，加点抗生素可能会好转。如果污染明显，虫子较多，就没救了 。