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楼主: HMC
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[请教] 冷冻细胞放-80度至少多久才可以放入液氮   [复制链接]

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发表于 2011-5-8 14:59 |只看该作者
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: G' [, M+ [7 _  l, {: F% B* f
( ?& y. @* J2 ]3 k* T过夜就可以了,
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发表于 2011-5-9 01:02 |只看该作者
看你用什么冻了,我们们用的异丙醇的冻存盒,说明是1分钟降一度,理论上2h就足够了,我们一般4h或过夜,包棉花就过夜,其实在-80不用太长时间,冻住就行了
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发表于 2011-5-9 01:05 |只看该作者
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9 w- j8 V/ p& @) T" F
( k3 k" W- q; W* T程序冻存效果没有直接扔在-80里好。
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发表于 2011-5-9 01:27 |只看该作者
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关键问题不是是时间问题,是你将你的细胞放置于-80后,它多长时间可以降至-80度。因为细胞冻存复苏的原则是"慢冻快融”,慢冻可以有效防止细胞内出现冰晶,对细胞产生伤害。我们使用的冻存盒是含有异丙醇做温度缓冲的,据产品说明讲该盒子可以做到每分钟降一度的速度。就是说放120分钟基本就可以了,我试过3小时,OK。但是不知道是不是所有细胞类型3小时都OK。
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发表于 2011-5-9 10:03 |只看该作者
六个小时以上吧,一般过夜放置,最好不要超过一个月。
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发表于 2011-5-9 10:15 |只看该作者
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; u' U* X6 r' b& B0 \
0 u7 q2 }/ t. p0 k- J受教了~

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发表于 2011-5-16 20:48 |只看该作者
我们是要用棉花包裹,再放到一个泡沫盒里,直接放到-80度,过夜,然后再投入液氮中。0 u0 i) u% S& J0 L
在-80放上几天貌似影响也不在。
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发表于 2011-5-16 21:03 |只看该作者
我们的做法是至少放4个小时就可以入液氮了,但一般都是过夜,操作方便,不用等时间
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发表于 2011-5-17 14:54 |只看该作者
楼上各层的做法都差不多啊,我们也是这样做的,用的是程序化冷冻盒,异丙醇做的缓冲剂,最短的我放了5个小时,长的可能是忘记了,放了1周左右,甚至半个月(千万不要这样,占着地方还可能会对细胞有影响,尽快转移到液氮中!)
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发表于 2011-5-17 15:37 |只看该作者
一般过夜就可以,但不宜过久,一周以上的话会对细胞活性有很大的影响。
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