T75培养瓶一半有细胞贴壁一半找不到没细胞？？请教高人指点

农夫有点田

CorningT75培养瓶 培养的脐带间充质干细胞 个别发现一半有细胞贴壁一半找不到没细胞？ 在培养之前确定不是细胞悬液未混匀导致的 请问这种进口的培养瓶内壁上有什么物质附在上面么？就是说易于细胞贴壁的物质 能不能是T75本身有问题 一半加了这种易于贴壁的物质 另一半没加啊？最近在有这种情况我再上传图 请高手帮忙分析一下 ？？非常感谢

killua

这个可能性不大，表面是有处理过的，但只是更有利于生长。即使没有处理过也不会完全不长细胞，细胞悬液混匀的话也只是处理过的地方长更快更密，没处理的长得少和慢些。而且制造工艺上时也不太可能会一半没处理的。

pauldong

我曾经也遇到过这样的情况，是不是培养箱隔板不平，导致混匀后的培养液流向一边，另外一边因为缺少培养基和细胞，就很少有贴壁

福牛

我用的也是康宁的，不同型号的皿，瓶也用过几种，感觉都长的不错，相对皿来说，瓶只是感觉操作起来要费力一些（比较多，开盖，烧口太费力），细胞长的都挺好。只是中间换过一批国产的皿（便宜……），能明显感觉到细胞贴壁能力下降，生长分布不均匀明显。至于楼主遇到的一半不长的情况，我觉得最大可能还是操作的问题，间充质细胞贴壁很快，这种康宁的皿，一般10分钟左右就贴壁了，所以加入细胞后要“及时晃匀”，晃皿的手法自己摸索吧。然后就是看看培养箱隔板是否倾斜，放培养皿（瓶）时一般会是重叠压着放吧，看看每个皿（瓶）之间是否对齐了。康宁的皿据说是有专利技术处理的，具体怎么处理的我也很想了解……。

农夫有点田

很感谢老师的指点 根据你们的建议我在摸索摸索 谢谢

jxydiandian

很同意pauldong的观点，我也遇到过这种情况，所以还是往瓶子里多加点培养基吧1

皮搋子

1. 75的瓶子要加20ml的培养液，175的瓶子要加35ml培养液，培养液少了容易导致铺的不均匀。& V4 T/ d+ n' p1 F) T$ H5 X# C2 ?
2. 铺瓶之后要及时摇晃，注意是左右摇晃，不要形成漩涡，不然的话细胞就被集中到瓶子中央。
7 J) [( E" W) B6 f' e3. 调整培养箱四个脚，保持水平状态。
! V3 Q5 n; J! z: ?9 N+ Y4. 几个瓶子摞在一起放的时候注意要卡住，不要放的不平整、

SCNT

个人感觉主要还是因为操作原因造成的

xwzy

吹打时尽量减少气泡的产生，产生的气泡容易堆积在培养瓶的下部，而且气泡里会有很多细胞，这样很容易导致铺的不均匀。