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楼主: zerollx
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维生素C溶液的配制?   [复制链接]

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发表于 2011-5-27 19:29 |只看该作者
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一般Vc的工作浓度是10ug/ml,你称取100mg溶于10ml的PBS中,0.22um滤器过滤,分装,一般最好用锡箔纸包住避光保存,4度。用的时候根据自己所需要的工作浓度稀释就好了
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发表于 2011-5-31 19:34 |只看该作者
我给个标准配方吧
+ @3 R$ \) [, B4 r' Q+ e: r维生素C必须使用2位磷酸化形式(sigma货号49752),或者盐形式(钠盐或者镁盐),否则肯定没有效果(溶解瞬间被氧化)
0 m! t) J" T* E0 w  H. q用超纯水配制即可,浓度随意,放负二十度保存# x* p# O+ @7 `+ b6 Z. M' S
, E! i9 u- M  k, @5 I  s& }# r+ L
不要试图在使用了GIBCO的KSR后还添加vitamin C,因为KSR假设用10%的话就已经含有50微克每毫升的维生素C了。
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发表于 2011-6-2 09:09 |只看该作者
发个裴原版的vc配方:- k! |; N$ |) }

0 A$ ^% Y8 q) n: t; \5 {/ H另外,附上裴的原文* S' J4 C' f! N: ^7 V6 z3 ?
希望对大家有用' d4 Y% q* }4 ]4 l& N# T
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发表于 2011-6-2 10:51 |只看该作者
VC是水溶性维生素,因此只要用PBS或者无血清的培养基配制成100倍浓度的贮存液,使用时按比例加入就可以了。配制好后先做除菌过滤。
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发表于 2011-6-2 14:49 |只看该作者
用于做iPS的Vc最好用Vc的稳定形式二磷酸维生素C,sigma 货号:49752。裴教授文章所用的Vc均是这个货号。50μg/ml也是指二磷酸维生素C的浓度。普通的Vc即抗坏血酸,很容易被氧化,4度保存超过2个星期效果就会大打折扣。二磷酸Vc是水溶性的,用超纯水配制50mg/ml 存储液,溶解看不到任何颗粒后0.22微米滤膜过滤,溶液有极微弱的黄色。分装长期保存在-20度,4度保存1个月,避光,重编程效率没有明显影响。做ips二磷酸Vc的工作浓度在20到100μg/ml之间均对重编程效率有显著提升作用,且效果相差不大。一般采用50μg/ml。
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发表于 2011-10-26 11:24 |只看该作者
回复 starlj 的帖子
* m1 R/ ?0 N& e! A* M8 O8 X9 I' v; M; H0 F5 n  ]+ W
才看到这个帖子,我就买错了,买成了Vc, 我就想这个东西这么容易氧化,怎么保存啊。晕死:(,赶紧订了一只49752,谢谢你分享

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发表于 2011-10-26 14:07 |只看该作者
请问一下,实际中加了Vc,作用大嘛?

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发表于 2011-11-28 21:18 |只看该作者
回复 sunny2829 的帖子* ^9 j, T9 O* C; ~1 X
1 {$ ~* Y' `: t% Z0 A, V
你好!我也在做这方面的实验,裴的那篇关于Vc可以提高iPS诱导效率的文章可以也发我一份吗?我邮箱yll824wanlf@yahoo.cn  ,不胜感激啊!

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发表于 2012-11-13 09:22 |只看该作者
对我很有帮助

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发表于 2012-11-23 13:59 |只看该作者
回复 sunny2829 的帖子
/ Y& `1 [! }, B' \2 k
9 \, W6 }7 P7 R: V, m0 M2 h浓度是50ug/ml。配成50mg/ml的存放于-20度。用的时候稀释1000倍。(我是其中一个作者)
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