求助，脂肪干细胞原代污染

临床干细胞

不用上图了，百分百的细菌污染，丢掉重做吧

jhu132llh

黑胶虫是圆圆的+ I' ^6 H) o+ \  Z
要是是杆状的话0 D5 B2 [; D7 k7 O+ w6 R
就不是黑胶虫
! C! h6 Y  }  U而是酵母类杆菌的可能性更大一些
& Q1 s/ k7 _/ w; d, I3 L) R并且，黑胶虫是看不见明显的细胞核的, q! x8 P- r. f9 z( M5 O
所以应该不是黑胶虫，应该是酵母类杆菌污染2 S1 [3 V, F6 _( {& Y
处理方法：8 t! j1 ?: ~- o( ?
1.勤换液，每次换液都洗涤一下
- j# O7 \' N# W1 z; Z9 l( Y2.加大双抗和庆大（有的实验室用两性霉素B）量至正常的10倍，经12-24小时培养后洗涤换液观察

ww2zyl

原因肯定出在没加抗生素 下次做加抗生素看看吧

翅膀111

我取的是大鼠腹股沟处脂肪，也就是75%酒精浸泡10分钟，然后剪开皮肤，同一把剪刀酒精擦拭后取得脂肪，做了几次都还好，第一次没成功，但不是污染，细胞海洋指导后（那是消化的原因），后面几次都成功了。只是有一次也出现了类似黑胶虫的污染，但是伴随有培养基很快变黄色，考虑可能有细菌污染了，就丢弃了。最近几次也发现细胞培养瓶里有类似黑胶虫的东西，但是培养基颜色没有变化，所以我就单纯用PBS冲洗了5遍，然后接着养，状态还不错，那些小虫子也不见了。黑胶虫是个有争论的东西，有研究说是细胞碎片在布朗运动，有研究说是血清里的成分，还有赞成是有害微生物的。不过我觉得如果你的培养基没有很快变黄，不妨试试我的方法，但如果伴随培养基颜色改变，考虑还是有细菌的污染，那你就要严格取材消毒程序，再培养看看了。祝你好运啊。

lnyxyzhangwei

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' H9 n' P8 c% M8 R
这瓶已经扔掉了，呵呵，谢谢了

franty

原代培养要在冲洗的PBS和培养基内加双抗，我第一次做没有加双抗就污染了。

等待feng

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- ?: y/ u: C) F% E7 f
& P! S& r! F% d! i/ _2 ~$ P哥哥  一年后  我也遇到了这样的困惑  请问你到最后找到了原因了吗？我最近好几次做的原代  也都是你这样的问题  老是污染。。。。求助啊

等待feng

回复 翅膀111 的帖子. {7 N! \/ g' y' r2 v8 k% M5 e5 x

1 S1 O5 m% T6 \+ I, U哥哥  你取得是几周的大鼠？  您是处死大鼠后放在酒精里浸泡吗？我觉得腹股沟那儿有褶皱 酒精不太容易浸泡到那个地方  我最近几次都污染了   唉。。。。愁

deshenglll

图也上的好一点

翅膀111

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3-4周龄大鼠啊，有一段时间也是取了就污染，是比较烦人。坚持吧。