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楼主: 临床干细胞
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[讨论] 我的一个思路,请问这样行不行   [复制链接]

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11楼
发表于 2011-6-1 11:49 |只看该作者
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学习啦。不过,如果用绿色荧光蛋白或者是LacZ等标记,会不会更直观呢?
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12楼
发表于 2011-6-1 21:40 |只看该作者
本帖最后由 张也行 于 2011-6-1 21:40 编辑
4 J. }5 I) i! |! I. C) V7 S3 s% [5 l5 [
也可以对注入的干细胞提前导入荧光蛋白等标记,这样就可以通过切片分析是不是你的干细胞发挥作用了。
6 r0 p+ E9 I& \8 L3 ^3 D, }- h/ t( k, g  k, k' {
我有一点不太明白,把一只动物的细胞注入到另一只动物难道就没有免疫排斥吗?
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13楼
发表于 2011-6-2 11:23 |只看该作者
直接标记细胞比较好,因为如果是用XY来检测的话,做PCR检测结果不是很具有说服力。我觉得检测移植效果,要看移植进去的细胞是否达到目的地,还有就是是否具有活性。
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14楼
发表于 2011-6-2 18:31 |只看该作者
似乎不错,用Y染色体上特殊DNA片段作为DNA探针做原位杂交应该可以确定移植干细胞的位置。
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15楼
发表于 2011-6-2 19:11 |只看该作者
grape 发表于 2011-6-1 10:37 - C) i( ?9 U0 @7 r, @" k
思路还可以。
0 S( A  A7 T5 Z& `4 }6 ?3 i+ r& c9 H但输注的干细胞和体内新生细胞如何区分?3 q$ Q' j# _: O) I
个人认为,性染色体改变不一定是受体自体产生的染 ...
% E7 I; J# o1 O5 h6 r6 Y
新生的细胞如果有Y染色体的话,就可以证明是由打入的干细胞分化而来的啊,难道我这样想不对吗
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16楼
发表于 2011-6-2 19:11 |只看该作者
懵懂干细胞 发表于 2011-6-1 10:18
7 C. s' q" q8 a6 X这个思想很好,在很多文献中都有用这个方法的!& X0 A9 B' Z' b! [
我给你一篇看看!就是外源的细胞来源动物与受体动物是异 ...
, l5 }; S- L! T% D6 [
非常感谢,我这就看一下

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17楼
发表于 2011-6-2 20:00 |只看该作者
回复 bathpp2007 的帖子
. E: ]8 z; B" _9 f2 ^7 v! J  {; Z! D- N  d- a6 w4 U6 `
请问你标记过么?是怎么标记的,用什么标记的?请教了!
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18楼
发表于 2011-6-3 11:16 |只看该作者
回复 st_oliver 的帖子; n9 j7 Y$ l! z3 K$ c
  z5 l- B) B, a7 k" ~
标记细胞可以用绿色荧光蛋白(GFP),可以选择转基因动物来提取细胞,当然也可以取正常动物的细胞,培养后转染GFP,但是自己转染的话GFP效率不高,而且不能稳定表达,大概4周后荧光几乎就消失了,转染对细胞本身就是一种伤害。所以如果要示踪的话,我劝你还是选转基因动物吧,很方便的,当然你的想法也是不错的,但是后期检测起来可能会很麻烦,不是每个实验室都可以做到的。
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19楼
发表于 2011-6-6 09:36 |只看该作者
回复 bin 的帖子4 E  P: m- n3 i% `9 Q) X
  m9 K2 D2 _! l0 U; A0 l
谢谢你的回复,用转基因动物当然最好,只是我所研究的是猪的iPS细胞,前期由于转基因猪的获得的也比较困难,也没有得到别人的细胞,现在要做后期的研究,标记只能选择其他方法了,有没有些比较好的,标记可靠、持久的方法介绍呢
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20楼
发表于 2011-6-7 21:48 |只看该作者
回复 st_oliver 的帖子+ R! U( }, K8 u" G7 B
; d2 _  J4 b9 l* N" q
听说用慢病毒转染GFP,然后可以筛选出稳定表达的阳性细胞,但是我没有做过,你或许可以试一试。
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