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楼主: lyrsea
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请教组织块如何很好地贴壁   [复制链接]

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小小研究员

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发表于 2011-6-18 20:09 |只看该作者
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回复 cactus006 的帖子# }2 I# Q8 w; c

- Y) {* F. l0 Z) Q" r建议你发新帖提问

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发表于 2012-7-30 14:17 |只看该作者
回复 chb611301 的帖子9 o" z# W9 K/ b1 X1 }. \
4 U& ?5 u9 B: F3 o0 ]
你好!请问你们做脐带间充质干细胞是用什么培养基?用外加其它成分吗?

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发表于 2012-8-3 11:47 |只看该作者
回复 death0270 的帖子6 f6 s( v1 u7 Y+ O$ U

% {& n) e1 v- f请问,培养过程中始终保持培养瓶中的培养基为1ml吗?

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发表于 2012-8-4 09:39 |只看该作者
回复 cactus006 的帖子4 i5 {/ d, |5 A7 _

- _2 b% |* D* F我的细胞一般都两周左右才长出来呢~耐性等等。
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发表于 2012-8-4 09:40 |只看该作者
回复 cactus006 的帖子5 v; M! B1 {1 n6 G
' h8 V+ a9 Q& g+ `: @+ e0 E
我的一般要2周左右才看见细胞,耐性等等~! K$ K* j4 ]/ P- S: c6 J
脐带也有个体差异吧~~

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发表于 2012-8-6 00:36 |只看该作者
cactus006 发表于 2011-6-18 08:59 7 A9 ^* _6 v# [5 ^- v" `
回复 chb611301 的帖子! f$ @3 ^: P" I1 O9 d
+ b# ~- q+ w5 I! j0 e
我用10cm的皿,每个皿只加2--3ml培养基,次日补液,大部分组织能贴壁;但是到现在已 ...

/ ]0 N; B: t& c3 x5天还太早,可以再等等,一般7天会看到少量MSC,10天左右会多点!6 q) T3 N( ]+ `
贴壁法的确是比较慢的
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发表于 2012-8-7 09:03 |只看该作者
新鲜脐带组织一般一周左右就可以爬出了,贴壁前先湿润培养瓶,T75加1.5-2ml,组织剪成小块后直接贴壁,注意处理脐带时需要用少量PBS湿润剪切。以后每天补液1-2ml。
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发表于 2012-8-7 16:37 |只看该作者
回复 cactus006 的帖子% J- A1 ]  e6 @: n4 ?! |4 C% m

* A, S. I+ E8 o没那么快,做好2周的准备吧~~有的确实快,但是和脐带自身关系很大!
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发表于 2012-8-21 16:31 |只看该作者
回复 大少爷 的帖子
- A$ o4 `% \8 N5 o$ m; ~! v" R( l3 n8 \
你好,看到你这个回帖:“我们实验室做脐带组织块时,先将其剪成1mm3左右的碎块,然后按重量接种,75cm2培养瓶,每瓶0.5g,加10ml培养基摇匀,静置培养,组织块贴壁效果较好。因为10ml培养基刚好可以覆盖整个瓶底,又不会太多,小组之快会很块贴壁”
& M* F+ |) G* a0 N
* J& y1 v/ H% Z( X2 R; L我初来做这个课题,请问你什么培养基,加什么因子啊?谢谢

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发表于 2012-8-21 17:20 |只看该作者
我们实验室在做脐带组织块法都是不倒置的,只需要将脐带胶样组织剪成0.5*0.5cm小块,大一点也没关系。然后PBS洗几遍,把胶样物质冲掉,然后均匀铺到皿底,先不放培养基在实验台静置5-10分钟,后轻轻加培养基不要没过组织块就放到培养箱。大概5-8天后才会看到少量细胞爬出,一般十几天后才可以传代。
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