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楼主: sannia
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[请教] 请教用MTT方法测过细胞proliferation的高手们   [复制链接]

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优秀会员 美女研究员

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发表于 2011-6-30 22:13 |只看该作者
多谢提醒!回头做了再来汇报结果。

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发表于 2011-7-1 11:02 |只看该作者
1. 用96孔板做实验,一般每个样品要测几个孔,还是一整版一个样品?' E# J% n5 m2 i- W" \
   每个样品做几个复孔,这个得看你同时做几个样品有没有标准品进行对照,MTT法影响因素比较多,所以说越多复孔,你的实验结果就越可信。除去四周的边缘效应,尽量做多复孔就可以。
" }6 A1 ^. a0 j0 L, c! L2. 加SDS-HCl 时要把贴壁细胞也吹起来吗?还有这一步的37度温育时间一般多少小时为好?
* H3 R  g; b- l 首先是你MTT如何吸出,可以将细胞板倒放于吸水纸上,这样可以防止细胞密度比较大的细胞整体脱落,影响实验结果。加入SDS-HCL后可放于摇床上振荡,使二者充分结合
) l0 X8 J( i1 F+ p: t$ W, ?8 h( H) z) c3. 测出来的吸光值怎么对应到细胞个数,自己要先做个直线先?4 G3 i: z, O3 Y7 b' [* m
OD值不能够对应到细胞个数,只能说OD值高细胞存活较多,OD值低细胞存活较少,以此来做出相应的曲线。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-7-8 10:17 |只看该作者
回复 linchee 的帖子" o7 f" ]# i. o8 ?
1 c5 w7 F' ]$ O: L  K- k7 T
我也想说是DMSO啊。% h& a% w1 K3 h. C
还是CCK8方便,生成的东西是可溶的
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