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1. 用96孔板做实验,一般每个样品要测几个孔,还是一整版一个样品?
. h/ u) G4 N* C! X 每个样品做几个复孔,这个得看你同时做几个样品有没有标准品进行对照,MTT法影响因素比较多,所以说越多复孔,你的实验结果就越可信。除去四周的边缘效应,尽量做多复孔就可以。! h% Q; u# _8 V9 ?! k: T
2. 加SDS-HCl 时要把贴壁细胞也吹起来吗?还有这一步的37度温育时间一般多少小时为好?
: L8 J) e- l, H9 o( l& I) g; F! k 首先是你MTT如何吸出,可以将细胞板倒放于吸水纸上,这样可以防止细胞密度比较大的细胞整体脱落,影响实验结果。加入SDS-HCL后可放于摇床上振荡,使二者充分结合
0 h9 E0 }8 y2 y* k3. 测出来的吸光值怎么对应到细胞个数,自己要先做个直线先?
- J. p7 a3 r) o3 [1 FOD值不能够对应到细胞个数,只能说OD值高细胞存活较多,OD值低细胞存活较少,以此来做出相应的曲线。 |
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