MEF的条件培养基可以保持小鼠胚胎干细胞的全能性吗

mayiwaiwai

回复 lipenix 的帖子& x* R( d/ b$ S$ |) p% }
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同学可给出你用的培养基成分吗，我也想用饲养层试试养干细胞，做增殖。方便的话可以发下你的protocol吗，

mayiwaiwai

回复 shangchunhua 的帖子
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请问什么是MEF的条件培养基呢，如何制备的，

lipenix

原来的MEF用完了，本周四我会重新做MEF，届时我会每步拍下照片，再写个过程发上来，可能要几周吧。

细胞海洋

回复 lipenix 的帖子4 K2 c- P4 h+ _# S

9 s0 {5 L: L; ~# \& y你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
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6 Y3 N% Y4 B) @( Y否则他会看不到
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细胞海洋

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* \& S+ I& b! O7 z0 M+ g& t看13楼

shangchunhua

回复 mayiwaiwai 的帖子
) L0 l' b5 J$ y6 P6 o$ i8 v
! o- [  ]6 `- v8 ^4 r8 Q就是用培养过MEF的培养基用来饲养ES细胞，制MEF-conditioned medium' A# a6 |  m4 s% o2 T: s7 Z1 p3 ~
备方法如下：将灭活的MEF接种到铺有明胶的培养皿中，第二天换成mES培养基，24h后收集培养基，离心后用0.22um的滤头过滤除菌。按照上述方法收集七天条件培养基，储存在4℃冰箱备用。
  K$ M; _- d9 z  y+ _

littleeley

我们实验室用的无MEF小鼠ESC培养, 0.2%明胶包被细胞培养板
  _1 k, U2 n/ c# G培养液: DMEM, 1 mM Sodium Pyruvate, 5% FBS (Invitrogen, 30044-333), 15% KSR (Invitrogen, 10828-028), 0.1 mM NEAA (Invitrogen, 11140-050), 0.1 mM β-ME (Invitrogen, 21985-023), 2 mM L-glu, 10 ng/ml LIF (Chemicon, )
1 r8 _2 \/ e! j, J细胞绝大多数保持不分化，可满足基本实验需求。

卢小小

很好很有帮助

卢小小

想问一下，dmem的货号是多少呀

wbj1983

回复 shangchunhua 的帖子; L9 w4 F& ?* U$ p$ O6 I
+ |1 }' k8 P& X9 P1 n7 m
答案肯定是否定的，因为小鼠ES要依赖LIF，如果培养基中不加LIF,ES细胞会分化的！