细胞污染, 请问是哪种菌? 怎么挽救. 谢谢

快到头了

回复 oucflora 的帖子0 b! D" _0 I' v& ?8 u
) |0 o0 l! D4 d. |7 ?* R' [: P
在养的ES克隆上, 有时能看到细胞表面有类似气泡一样的东西, 不知道是不是你说的生长在细胞表面的细菌, 但感觉应该不像, 因为之前没污染的时候ES克隆上就能看到这种气泡样的东西,在低浓度双抗或者不加双抗的培养基中培养, 都没什么变化, 所以不能确定.0 B, j9 z" B( T( {) |
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此外,应该不是血清污染, 我用的是Gibco的血清, 一直都没问题, 配好后培养基都是0.22的滤器过滤的,所以应该不是血清问题吧.
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- F' l6 u; H& B污染的细胞还没有冻存, 不能扔啊, 哭.... 在双倍的双抗处理后, 像那些大的团块都没有了, 现在我用正常浓度的双抗培养了两代, 没再看到那种大团块的出现, 不过皿里有些跟MEF细胞大小一样的亮亮的圆点, 不知道是凋亡细胞还是没除干净的细菌.

快到头了

rain2402 发表于 2011-8-16 09:00
- J$ J" d1 s2 _* d+ O感觉像是细菌的污染。你的细胞要是非常珍贵，你就用双抗冲洗几次，然后培养基中多加些双抗培养。这瓶留在这 ...

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我之前就是这么做的,还是有些效果, 大的团块都没了, 就是不知道有没有去除干净

快到头了

123jiaoyue 发表于 2011-8-16 09:09 9 N, W# c1 t+ _+ V7 \
不是霉菌污染 霉菌污染不是这样的 其实未必是污染 可能是你的血清选的不适宜细胞生长，分泌出来的一些东西  ...

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应该是污染了, 血清我确定是没问题的0 ?* L' @% d9 u( _0 Z  T6 P5 b+ s
" `: u1 X4 o1 J
谢谢你的建议

快到头了

y6064031 发表于 2011-8-16 09:52
0 n% r1 q& F( h3 P4 a呵呵，培养的还不错嘛

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你是说其他细胞, 还是幸灾乐祸啊...' K+ E2 G# D" m

- t& S7 y8 Y# g& N崩溃了...

快到头了

饶冠华 发表于 2011-8-16 12:47
# @5 ^% U# L, a回复 快到头了 的帖子
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7 u9 S3 n5 E: Z/ _9 r' \/ D你确定是污染还是细胞老化啊？你养的是间充质细胞么？还是什么细胞？

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是污染了, 如果不加双抗, 那种大的团块会把整个皿都铺满
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养的ES和iPS......

oucflora

回复 sizhengliu 的帖子' w4 ~$ O8 U% @3 ~- `$ ]& W" ^

1 J) j2 E) N+ ~5 l如果你的细胞很珍贵，只能暂时按照我说的那样去培养，不过换液和传代时注意单独处理，不要污染了其他细胞

oucflora

回复 快到头了 的帖子$ {. y2 H3 S6 b' C: z' W7 r
1 M$ S+ g3 C9 u$ [  r
你说的气泡样的东西，不是楼主图片中的物质。跟细胞大小一样的亮点应该不是你图片中的物质。一般的细菌很小的，显微镜下很难分辨清楚的，而且细菌污染严重后，培养液会变成黄绿色，培养液中会发现流沙状的物质。

wang3033

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4 D& f' o. h+ X0 J5 Z) g& Q+ A1 G9 M+ h7 `! ^* F; h- ~& F
不谢！！其实细胞培养实验没那么复杂，

kosmos.y

这个细菌污染太难挽救了，还是建议丢掉，从头来过吧~~~

bb6120

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那你用PBS洗几次，再继续加双倍双抗进去培养，看看细胞状态。