关于质粒浓缩的问题

christophe

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那柱子提过之后去掉了内毒素，再用乙醇沉淀浓缩的话应该还是没有内毒素的吧？

hygene

回复 christophe 的帖子2 w, }3 A# @2 ?. g' m
! ~2 Z8 p* V, d% V8 ~
可以先用乙醇沉淀浓缩，再过柱子

huangcong1988

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1 ]  B/ R) |' s% v  R) {' R1 h! M  y
是用于细胞转染的,所以还是想用去内毒素的柱子再过一遍,但是我不知道再过柱是从哪一步开始

huangcong1988

回复 hygene 的帖子  G3 x: p# ]; f+ U& u9 d
; p5 }, A6 _4 p' M. M+ w
想问问你,再过柱是从哪一步开始?

hygene

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1 w+ }0 ?. j9 c- t1 x1 J' U8 }7 j( e" }
乙醇沉淀浓缩后用小体积超纯水稀释，接下来就可以过柱子了。

huangcong1988

回复 hygene 的帖子; g' X/ e* f" v) L- ]( ~1 s

0 [2 U; W8 f" r9 ~. ~  M/ n用无水乙醇还是75的？应该不会产生沉淀吧？就是说加了乙醇之后转移至柱中，静置，离心，完了之后洗脱？

christophe

回复 hygene 的帖子7 L. Q% W& W3 m& }/ C0 i! {
: I' Z, r% J2 e1 o5 {% c2 x, q
你的意思是将水浓缩溶解的质粒过一下柱子，质粒通过了柱子，而内毒素被截留在柱子上了是吗？

POPOLD

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- _2 Q. M- n5 L' x- m; M+ D+ S7 G5 F1 o6 R( F
抽真空离心机

huangcong1988

回复 hygene 的帖子& B* ]1 ?" J) z: d  d
) c3 A& f4 ^5 t& g* O
想问问你质粒浓缩的具体步骤，就是加了乙醇之后，将加有乙醇的质粒加到柱中，然后离心，接着用超纯水洗柱就行了？

zhouchaoying100

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2 z* g3 g4 Z* i9 A/ n/ H( ~4 ~4 k. z
你好，我也遇到了同样的问题。请问你的去内毒素质粒重新过柱后浓度能提高到什么样？重新过柱的具体步骤是怎么样的？盼相告，不胜感激！