脐带间充质干细胞问题

topling

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# e! ?' D# ?: x4 p* F) a1 a首先谢谢各位！我们的原代细胞生长较慢，且大多数成团生长，分部不均匀。我们在传第代时通常先传一个小瓶再传大瓶，再分瓶。因为原代细胞状态好的非常少，而且生长很慢，有的根本张不起来，所以只能先传小瓶。传过代后细胞生长较慢且容易衰老，边缘变得不光滑，面积变大。在养得过程中会有会有很多死细胞和细胞碎片，我们每四天换一次液，换过液后也会有大量死细胞，大部分细胞会变大颜色变暗淡成不规则的网状。还有我们养的间充质细胞应该不是支原体污染，这个我们每次都做检测。还有在第一次换液时我们会在培养基中加EGF，血清用的是进口的，一般加入10%。照片我尽快拍了上传，劳烦各位了。
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topling

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首先谢谢各位！我们的原代细胞生长较慢，且大多数成团生长，分部不均匀。我们在传第代时通常先传一个小瓶再传大瓶，再分瓶。因为原代细胞状态好的非常少，而且生长很慢，有的根本张不起来，所以只能先传小瓶。传过代后细胞生长较慢且容易衰老，边缘变得不光滑，面积变大。在养得过程中会有会有很多死细胞和细胞碎片，我们每四天换一次液，换过液后也会有大量死细胞，大部分细胞会变大颜色变暗淡成不规则的网状。还有我们养的间充质细胞应该不是支原体污染，这个我们每次都做检测。还有在第一次换液时我们会在培养基中加EGF，血清用的是进口的，一般加入10%。照片我尽快拍了上传，劳烦各位了。
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topling

回复 流泪的鱼 的帖子0 o# m1 F) |4 d: Q. u/ p0 y

1 s  ~. k$ _5 t3 K首先谢谢各位！我们的原代细胞生长较慢，且大多数成团生长，分部不均匀。我们在传第代时通常先传一个小瓶再传大瓶，再分瓶。因为原代细胞状态好的非常少，而且生长很慢，有的根本张不起来，所以只能先传小瓶。传过代后细胞生长较慢且容易衰老，边缘变得不光滑，面积变大。在养得过程中会有会有很多死细胞和细胞碎片，我们每四天换一次液，换过液后也会有大量死细胞，大部分细胞会变大颜色变暗淡成不规则的网状。还有我们养的间充质细胞应该不是支原体污染，这个我们每次都做检测。还有在第一次换液时我们会在培养基中加EGF，血清用的是进口的，一般加入10%。照片我尽快拍了上传，劳烦各位了。 ) r5 y6 Y6 H/ ?

1301918986

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3 Y, P7 L) l+ K7 s不知道你的原代是什么方法做的，如果是组织块法就是克隆生长，分布肯定会不均匀。原代细胞生长本来就很慢，但传代后生长会快很多，一般隔天就可以传了。

hwlightning

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EGF的含量是不是偏高？细胞因子能加速细胞的增值也能加速细胞老化。
/ L3 r0 `$ A- i( ?" W9 y细胞更换培养基也要根据细胞的状态来，每四天换液我觉得时间有点长，
  y+ j" z) P; `脐带MSC成团生长，我没遇到过，成漩涡状吧！鉴定下你养的是不是MSC，
2 F6 E2 X' J6 `% m& g脐带MSC很好养，我就用的自己配置的粉末低糖DMEM+10%胎牛血清。状态很好啊！