脐带间充质干细胞问题

topling

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首先谢谢各位！我们的原代细胞生长较慢，且大多数成团生长，分部不均匀。我们在传第代时通常先传一个小瓶再传大瓶，再分瓶。因为原代细胞状态好的非常少，而且生长很慢，有的根本张不起来，所以只能先传小瓶。传过代后细胞生长较慢且容易衰老，边缘变得不光滑，面积变大。在养得过程中会有会有很多死细胞和细胞碎片，我们每四天换一次液，换过液后也会有大量死细胞，大部分细胞会变大颜色变暗淡成不规则的网状。还有我们养的间充质细胞应该不是支原体污染，这个我们每次都做检测。还有在第一次换液时我们会在培养基中加EGF，血清用的是进口的，一般加入10%。照片我尽快拍了上传，劳烦各位了。 5 ~. K3 }, V' R+ T; V3 X+ b! ~

topling

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' u3 }7 Y' z7 B2 Q5 `; L首先谢谢各位！我们的原代细胞生长较慢，且大多数成团生长，分部不均匀。我们在传第代时通常先传一个小瓶再传大瓶，再分瓶。因为原代细胞状态好的非常少，而且生长很慢，有的根本张不起来，所以只能先传小瓶。传过代后细胞生长较慢且容易衰老，边缘变得不光滑，面积变大。在养得过程中会有会有很多死细胞和细胞碎片，我们每四天换一次液，换过液后也会有大量死细胞，大部分细胞会变大颜色变暗淡成不规则的网状。还有我们养的间充质细胞应该不是支原体污染，这个我们每次都做检测。还有在第一次换液时我们会在培养基中加EGF，血清用的是进口的，一般加入10%。照片我尽快拍了上传，劳烦各位了。 8 _+ H, u4 `! N4 X  @, T, [) O  h

topling

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' I( l6 L( R2 e, A1 A0 x首先谢谢各位！我们的原代细胞生长较慢，且大多数成团生长，分部不均匀。我们在传第代时通常先传一个小瓶再传大瓶，再分瓶。因为原代细胞状态好的非常少，而且生长很慢，有的根本张不起来，所以只能先传小瓶。传过代后细胞生长较慢且容易衰老，边缘变得不光滑，面积变大。在养得过程中会有会有很多死细胞和细胞碎片，我们每四天换一次液，换过液后也会有大量死细胞，大部分细胞会变大颜色变暗淡成不规则的网状。还有我们养的间充质细胞应该不是支原体污染，这个我们每次都做检测。还有在第一次换液时我们会在培养基中加EGF，血清用的是进口的，一般加入10%。照片我尽快拍了上传，劳烦各位了。
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1301918986

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不知道你的原代是什么方法做的，如果是组织块法就是克隆生长，分布肯定会不均匀。原代细胞生长本来就很慢，但传代后生长会快很多，一般隔天就可以传了。

hwlightning

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& t. I$ ~3 z6 S; a
& ~) a+ ?. P7 ]3 ]7 \& [, JEGF的含量是不是偏高？细胞因子能加速细胞的增值也能加速细胞老化。
" n2 q6 f! w8 C! a+ P3 u细胞更换培养基也要根据细胞的状态来，每四天换液我觉得时间有点长，: _/ E0 ?, b" X8 O8 ~7 l
脐带MSC成团生长，我没遇到过，成漩涡状吧！鉴定下你养的是不是MSC，
" N/ L# e2 o) y: b* F脐带MSC很好养，我就用的自己配置的粉末低糖DMEM+10%胎牛血清。状态很好啊！