求角膜缘干细胞有关文献啊，我是做角膜移植的

yinjiqingqq

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如果有原文可以分享吗？大家共同学习。

yinjiqingqq

原代培养如果用组织块法是很难纯化角膜上皮细胞和基质细胞，但是使用酶消化可以使上皮与基质分离，所得细胞单一，利于基础研究。至于内皮细胞我们实验室的前辈也做过，培养很难。有做内皮的童鞋和老师，能传传经吗？

fguw

顶一下，：）

细胞-77

我们实验室有一部分同学做角膜内皮的，培养很难，主要是在：一是从取原代时的方法选择，酶的选择，消化时间等，二是培养液的选择，兔的内皮，牛角膜内皮比较好养，一般不用加生长因子就可以培养出来，但人的比较困难，一般要加一些生长因子。一般的情况下，三天就可以看见一些细胞贴壁很好，大约一个星期细胞生长融合成单层。

yinjiqingqq

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我没有做过角膜内皮，但是个人觉得，内皮是单层细胞，原代分离应该有些难度吧。一般易培养的内皮细胞能传几代？

fguw

角膜有三种细胞，从原代培养开始就没有什么合适的protocol,上皮和基质细胞在理论上是可以增值的，而且在角膜缘处有上皮的stem cell，但是内皮细胞被认为是没有增长能力，如果想建系，比较困难。老化情况在元代培养的情况下出现过，但细胞一旦过了30几代，就没有老化现象了---------------------过了30代就是所谓的hayflick limit，
% \9 \: O* x( E! x. x理论上，原代细胞不可能可以传很多代的，每传一次都会有老化情况，

细胞-77

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我们做实验一般是P1-P5的细胞用来做实验。具体能够传几代我们没有测试过。