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楼主: zhuzhoujie24
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我的间充质干细胞不长!   [复制链接]

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专家 优秀会员 金话筒

11楼
发表于 2011-11-1 08:58 |只看该作者
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首先是血清问题, 进口血清推荐。. _: F$ O- _  c: B; d+ j
另外高糖DMEM不是很适合。
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12楼
发表于 2011-11-1 11:50 |只看该作者
很可能是试剂问题,最近国内试剂假的太多太多了害人不浅
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金话筒 优秀会员

13楼
发表于 2011-11-5 20:16 |只看该作者
肯定是血清问题,MSC最好用FBS,NBS生长肯定不好啊
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14楼
发表于 2011-11-5 22:19 |只看该作者
关于血清及培养基的问题真是众说纷纭永无止境啊。。
6 W4 U$ @! [+ d; s) g我用过DMEM/F12及高糖DMEM的,感觉DMEM/F12长得更快更好,高糖我们加了7-8%的胎牛,长也能长,但效果较差。
' x$ A! J% L# C" t现在在试低糖DMEM。+ P4 C; y/ h! E% d
另外看很多国外文献用的是α-MEM的,对这个培养液不甚了解,有了解的能介绍下吗?
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15楼
发表于 2011-11-13 19:28 |只看该作者
干细胞是不是低糖的培养基更适合些
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16楼
发表于 2011-11-13 20:10 |只看该作者
四季青的血清培养原代细胞运气好也长得出来,但是,如果要做传代培养的话,原代开始请不要用四季青的血清。因为我开始也老出现这样的情况,后面改用Gibico血清后,这个问题也就解决了。需要特别说明的是,我那次是托朋友买的1900元/500ml,其实比你的四季青也就差不多两倍的价格。培养基我用的是国产低糖DMEM。/ s, S# s; Y4 _. |) H1 [

7 P* n# i$ q: H! i5 \( @9 T3 d当然,用低糖培养基还是高糖培养基,通常要根据你养的MSC源是什么而定,比如小鼠和人的MSC,通常用低糖。
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17楼
发表于 2011-11-13 20:15 |只看该作者
zhuzhoujie24 发表于 2011-10-28 13:52
+ E) P: q) `, P用的是DMEM高糖培养基,血清用的是四季青。细胞原代获取的数量还可以,但是就是在培养基里不怎么长,都1个多 ...

9 K6 R3 }+ e1 d+ x$ ?针对你说的现象,我还有一个疑问:你对这瓶不长的细胞有没有做过支原体分析?
8 ?1 o: q% `% x9 x) A
& y! u# p, F( N6 {我们培养细胞的过程中,通常鉴定有没有污染,也就是简单的看培养液有没有变浑浊和显微镜下看有没有菌丝等。但这两种方法都没有办法分析支原体,即使是通过0.22微米的过滤器过滤培养液,也没办法除去支原体,就我个人而言,通常如果我怀疑某瓶细胞有支原体污染,也就得将这瓶细胞处理掉,从头再来。
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18楼
发表于 2011-12-3 22:54 |只看该作者
回复 sailree 的帖子
5 \" j6 |1 f# o* F$ \' N1 ~+ n
+ r& D6 I* b; c; |# `它老是不长,所以都没办法消化啊,是不是有杂细胞的原因?
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