求教 单细胞克隆

shuicaoxi

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2 X, A) p( L5 W6 k0 i9 P+ o% P$ y' @/ u% c& k% Q, J- f7 S
不会吧，BrdU这个还要延期，呜呜，我当初干嘛选这个题啊，我死了算了。害怕老板，唉，悲剧。

idealgas

回复 shuicaoxi 的帖子* w5 P% d. x1 |; @& @

+ t6 h- N) Y" t6 |* u2 F$ E这个还真没有什么深入的研究，只是以前有个师弟做过细胞系的建立，多少知道点东西，没有深入看过文献，没办法帮你了。呵呵

echowdk

回复 流浪的波斯猫 的帖子3 Q$ p$ ~4 J8 e8 z8 b8 u. E2 J

& ^2 f$ n' T, f2 k原来接种密度要把握的这么严格。能不能说一下具体的接种密度一般是多大呢？

流浪的波斯猫

回复 echowdk 的帖子4 }+ I3 p; V* {/ x: F! x/ @) m

! j" R' v* q6 ^4 D$ ?3 a这个要摸索的吧 具体多大我也不知道的 呵呵 不好意思了哇

bin

证明一种细胞是不是干细胞，除了通过细胞单克隆得到细胞系以外，还要对得到的细胞系进行多向分化潜能的鉴定以及相关干细胞标志物的鉴定，比如nestin+，Sox2+等。总之这个过程很复杂，我也在挑细胞单克隆，做了好几个月了，最近才有一点眉目，耐心挑吧，总会找到的，不过我不建议用有限稀释法，细胞在96孔板里增殖速度太慢了，可以选择甲基纤维素或软琼脂，这样可能会快很多。祝你成功！

bin

你可以把消化下来的细胞以比较低的密度（<50000/ml）种在琼脂中，如果能够长出细胞球就说明这个细胞的增殖能力很强，然后再对细胞球分析，这样会比你盲目挑选要好很多，但是要注意一点是有些细胞必须要贴壁才能增殖，对于这一类细胞是不适合用琼脂的，但是可以用平皿发，看看《细胞培养》这本教材，上面介绍很详细。