关于细胞计数的问题

lunyuyuanxj

1、稀释倍数视细胞多少而定，太多数起来太费劲，太少会产生较大误差；
  Q. J1 g1 i8 o1 d+ p3 [2、计数时一般计数四个角的四个大方格，若想降低误差可多数几个大方格，计数原则：数上不数下，数左不数右；
. C! j1 V1 L, V3、细胞总数=A*B*C*10000（A：平均每大方格细胞数，B：稀释倍数，C：稀释前细胞悬液总体积数（ml)

vickyhouyu

最适合数的浓度是一个小方格中有1个细胞，那么一个中方格中有16个细胞，一个大方格（0.1ul体积）中有400个细胞，也就是最适浓度是400万/毫升。: _" {9 E5 p/ K% g3 X% X
一般不确定细胞的浓度就用少量的PBS先稀释，取10ul滴到计数板上看一下，推算一下要稀释多少倍比较合适。
- [7 Y' }3 g6 k. Q% p3 I我一般数的时候为了好算一些，就数四个角的中方格和正中间的一个中方格。这样5个中方格的细胞数加起来的数乘以5 ，得到的数n就是每毫升有n万个细胞。
  z  q1 }# n8 N+ U" s6 d( B祝实验顺利！

song58

我倒觉得如果对计数要求很高的话，可以使用其他一些计数的仪器，例如Millipore的Scepter

laputave

我在计数时发现加样量不同会影响到计数我只做过10ul和20ul的量，发现加入20ul时，距离加样孔较远的两个大格子中的细胞数多于距离较近的两个大格子中的细胞数接近一倍的数目~~这些有影响吗？我实验室菜鸟一枚，求前辈指点迷津

nculsa747

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看文档不如看视频，
( F' a: c* R- r. s+ V( b
0 W1 L; N- O/ O# x
2 {! b  \8 k& J 现在都用计数枪或仪来计数了，如Millipore的secepter2，只是它不能区分死细胞，要用PBS溶解细胞才行；